|
脂多糖对化学诱癌大鼠抗氧化系统的选择性损害作用 |
| |
ma)；鲎试剂盒(上海伊华临床医学科研公司)；超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)测试盒、丙二醛(malondialdehyde,MDA)测试盒、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH－Px)测试盒、过氧化氢酶(catalase,CAT)测试盒均由南京建成生物工程研究所提供。
(三)肝硬化癌变模型复制和分组处理：30只大鼠随机分为5组。正常对照(control)组只饮用自来水；TAA组饮用0.3 g/L TAA水；TAA＋LPS组在诱癌的4～6月期间于0.3 g/L TAA饮水中加8 mg/L LPS(相当于每天 50 μg LPS／100 g BW)；TAA＋ST组在实验开始前一周作脾切除(splenectomy,ST)手术；TAA＋ST＋LPS组在TAA诱发肝癌模型基础上，施加同前两组相同的脾切除和8 mg/L LPS处理。诱癌6个月结束时，乙醚麻醉下，脾主动脉取血分离血浆及取2克肝组织制备肝匀浆。
(四)测定指标和方法：蛋白定量用双缩尿法，以牛血清白蛋白作标准；用鲎试剂盒测血浆内毒素；抗氧化酶测试盒测定SOD(羟胺法)，GSH－Px(二硫对二硝基苯甲酸法)，CAT(紫外法)和MDA(硫代巴比妥酸法)，测定步骤按说明书操作。取肝中叶的1／2固定于10%甲醛液，石蜡包埋切片，HE染色，进行组织学观察。
(五)统计处理：数据以±s表示，用SPSS统计程序对结果作t检验和参数相关性分析。
结果
(一)内毒素血症和肝癌发生率：用0.3 g/L TAA诱发大鼠肝癌的6个月过程中，未见一动物死亡。在TAA作用4个月形成肝硬化时［5］，给予外源性LPS(8 mg/L，2个月)可使实验动物体循环中LPS浓度升高9%(P＜0.05)；实验前作脾切除可使TAA诱癌动物肠源性内毒素血症水平明显提高20%(P＜0.05)；大鼠饮用0.3 g/L TAA 6个月，肝脏质地变硬，重量显著增加(P＜0.01，资料未显示)，肝表面形成增生结节呈浅黄色，癌变部分呈灰白色。镜下可见肝组织纤维化，假小叶形成；癌变肝细胞异型性，呈假腺管型结构；胞核深染，胞浆嗜碱性染色及低度分化现象。不同处理组肉眼可见的肝癌发生率与其内毒素血症水平密切相关(r＝0.99，P＜0.01)(表1)。
表1 不同处理组大鼠内毒素血症和肝癌发生率
Tab 1 Incidence of hepatocarcinoma and endotoxemia in rats (±s)
Group n Endotoxin
(×103 EU／L) Hepatocarcinoma rate
Visible Under microscope
Control 5 95±15 0%(0／5） 0%(0／5）
TAA 6 108±12 17%(1／6） 50%(3／6)
TAA＋LPS 6 118±12* 33%(2／6） 50%(3／6）
TAA±ST 6 130±31* 50%(3／6） 67%(4／6）
TAA＋ST＋LPS 6 130±18*△ 67%(4／6） 67%(4／6)
*P＜0.05，vs control group;△P＜0.05，vs TAA group
(二)脂质过氧化损伤：MDA是脂质过氧化反应的终末产物，间接反映自由基水平或肝组织脂质过氧化损伤的程度。表2可见，TAA＋LPS组和TAA＋ST＋LPS组大鼠肝脏MDA含量较高，表明大鼠肝硬化时给予外源性LPS能加剧肝脏脂质过氧化损伤作用。肝匀浆MDA浓度比血浆高30～56倍，提示肝脏是自由基产生和清除的最主要器官之一。
上一页 [1] [2]
上一个医学论文： 诱导型一氧化氮合酶在强啡肽致脊髓损伤中的作用
下一个医学论文： 型胶原与氧化性低密度脂蛋白相互作用的机制研究
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文