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gadd153基因对卵巢癌细胞生长抑制作用的研究 |
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周志春 冯捷 钱和年 王申五 崔恒 付天云 叶雪
【摘要】 目的 研究生长抑制DNA损伤基因(growth arrest and DNA damage, gadd)对卵巢癌细胞生长抑制和凋亡的作用。 方法 RT-PCR鉴定卵巢癌SKOV3和3AO细胞株gadd153基因表达。通过目的基因的克隆、载体构建技术，将目的基因gadd153重组于plXSN-neo逆转录病毒表达载体；构建的pLXSN-gadd153载体采用脂质体(lipofectin)(DOTAP)的方法，分别转染SKOV3和3AO细胞株；经G418抗性筛选；RT-PCR表达鉴定；足叶乙甙(VP16)诱导，采用流式细胞仪分析(FCM)的方法检测转染前后肿瘤细胞的生长抑制和凋亡。 结果 SKOV3-gadd153细胞生长抑制在G1／G0期，部分细胞进入凋亡的状态；3AO-gadd153细胞生长抑制，未引起凋亡。 结论 转染gadd153基因的肿瘤细胞系，诱 导表达后可诱发肿瘤细胞生长抑制在G1／G0期，并有细胞进入凋亡状态。证实gadd153基因参与了细胞生长抑制和凋亡过程。
【关键词】 gadd153基因 卵巢癌细胞 生长抑制 凋亡
THE STUDY OF EFFECTS OF gadd153 GENES ON CELL GROWTH
AND APOPTOSIS OF OVARIAN CANCER CELL IN VITRO
Zhou Zhichun, Feng JieΔ, Qian Henian, Wang Shenwu*, Cui Heng, Fu Tianyun, Yexue
(Gynecologic Oncology Center,*The Central Laboratory, People s Hospital, Beijing Medical University, Beijing)
【Abstract】 Objective To study the effects of growth arrest and DNA damage(gadd) genes on the growth and apoptosis in ovarian cancer cell lines. Methods We constructed a retrovirus(pLXSN-gadd153)which was transfected into SKOV3 and 3AO with lipofectin (DOTAP),respectively, then screened by anti-G418 and identified the expression of gadd153 genes by RT-PCR. Apoptosis was analyzed using FCM and DNA ladder. Results Growth inhibition and the apoptosis were observed in the SKOV3 cells transferred with gadd153 genes and also in the 3AO cells transferred with the same genes but there was only growth inhibition with no apoptosis occured. Conclusions The expression of gadd153 could make tumor cells arrested in G1／G0 and apoptosis could be developed in some other cell lines.
【Key words】 gadd153 genes; Ovarian cancer cell lines; Growth inhibition; Apoptosis
卵巢恶性肿瘤死亡率居妇科恶性肿瘤首位。肿瘤细胞群体的一大特征是细胞增殖与分化平衡失调，这一调节过程有许多癌基因、抑癌基因的参与。许多文献报道了有关与细胞分化和凋亡的基因，为探索肿瘤发生奠定了基础。我们就gadd153基因对卵巢癌细胞株的作用进行了初步研究。
材料和方法
1. 材料
1.1 细胞株：SKOV3为卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株，来源于美国Memorial Sloan-Kettering [1] [2] 下一页
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