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急进性肾小球肾炎中抗肾小球基底膜抗体的检测及其临床意义 |
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刘娜 赵明辉 章友康 郑欣 王海燕
国外报道抗肾小球基底膜(GBM)抗体在包括所有的原发性和继发性急进性肾小球肾炎(RPGN)中阳性率为20%左右［1］，而国内以往报道的仅为5%～10%左右［2，3］，这种明显差异是种族或检测方法学的不同所致，其原因不清。本研究应用人GBM可溶性抗原，以ELISA方法检测我院近6年来所有RPGN患者血清抗GBM抗体并对其临床意义进行了分析。
一、材料和方法
1.病例选择：所有病例均来自1991年1月～1996年10月住我院肾内科，具有完整的临床、病理资料的肾小球肾炎患者。RPGN组29例，其诊断标准均符合1993年黄山会议制定的诊断标准。对照组选用同期经肾活检证实的非新月体肾小球肾炎120例，其中IgA肾病20例，系膜增殖性肾炎15例，微小病变20例，膜性肾病20例，膜增殖性肾炎5例，狼疮性肾炎20例，过敏性紫癜肾炎20例。58例正常血清来自正常献血员。
2.抗GBM抗体的检测：肾小球基底膜可溶性抗原的制备根据Bowman和Lockwood的方法［4］。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测抗GBM抗体。对ELISA阳性血清进行间接免疫荧光(IIF)方法检测，并将制备的可溶性GBM抗原在非还原状态下进行十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，应用免疫印迹法(Western blot analysis)鉴定抗GBM抗体。
附表 5例抗GBM抗体阳性患者临床及病理资料
例号 性别 年龄
(岁) 临床病理诊断 ANCA 少尿或
无尿 血肌酐(μmol/L) 新月体
类型
疗前 疗后
1 男 17 原发RPGNⅠ型 - + 1 408 1 056 CCG
2 男 32 原发RPGNⅠ型 - + 773 744 CCG
3 男 18 原发RPGNⅠ型 - - 561 128 CFCG
4 男 18 过敏性紫癜肾炎+RPGN - + 1 135 1 120 CFCG
5 女 52 原发RPGN Ⅲ型 + + 822 867 CCG
注：CCG：细胞新月体；CFCG：细胞纤维新月体；RPGN：急进性肾小球肾炎；ANCA：抗中性粒细胞胞浆抗体
二、结果
1.抗GBM抗体的检测：应用ELISA方法，58例正常人及120例非新月体肾小球肾炎患者中，无一例抗GBM抗体阳性。29例RPGN患者中，5例抗GBM抗体阳性，占17%。其中3例曾应用IIF检测抗GBM抗体，1例阳性，1例可疑阳性。对这5例血清重新应用正常新鲜肾组织冰冻切片进行IIF法检查，全部呈现阳性结果。经免疫印迹检测，这5份抗GBM抗体阳性血清均识别40 000～54 000、23 000～27 000的蛋白。
2.抗GBM抗体阳性患者临床特点：见附表。5例中全身系统症状较少，1例Goodpasture综合征患者有咯血，1例原发性RPGN Ⅰ型患者伴有腹痛、便血等消化道症状。1例患者一年前曾出现皮疹、关节痛、腹痛、黑便、肾炎等典型的过敏性紫癜表现，此次发病无明显肾外表现。全部患者均于肾穿刺1周内开始进行甲基泼尼松龙及环磷酰胺冲击，仅1例不伴有少尿及血肌酐未达尿毒症水平的患者脱离透析，其余4例均都依赖透析。
讨论 国外报道ELISA或RIA方法检测血抗GBM抗体有较高的灵敏度及特异性，其灵敏度达90%～95%，特异性达98%～99%，但该方法在国内尚未普及，我们应用ELISA方法进行了血抗GBM抗体的检测，在120例非新月体肾炎中无一例抗GBM抗体阳性；在29例RPGN中5例抗GBM抗体阳性，免疫印迹证实全部5份血清均识别40 000～54 000、23 000～27 000的蛋白条带，与以往的报道相一致［5］。表明用ELISA方法检测抗GBM抗体方法可靠、简便，结果稳定。
在全部29例原发性和继发性RPGN患者中5例抗GBM抗体阳性，占17%，与国外报道的发生率相似。本组抗GBM抗体不拘泥于Goodpasture综合征及原发性RPGN Ⅰ型，在1例过敏性紫癜肾炎及1例ANCA阳性的原发性RPGN Ⅲ型患者中亦检测到抗GBM抗体。以往报道的抗GBM抗体型RPGN发生率低，可能与以往IIF法检测抗GBM抗体灵敏度较低及未对RPGN病人进行常规抗GBM抗体检测有关。
本组5例患者中，于我院就诊时已有4例出现无尿/少尿，并进入尿毒症期，经免疫抑制治疗，肾功能未能恢复，[1] [2] 下一页
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