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植入电极记录豚鼠图形视觉诱发电位

【摘要】  目的 探讨用植入电极方式记录豚鼠图形视觉诱发电位(pattern visual evoked potential,PVEP)的方法。方法 豚鼠麻醉后,暴露颅骨表面,在前囟(Bregma)前6 mm、后10 mm及矢状缝正中处钻孔,均植入长5 mm、直径为1.2 mm的不锈钢螺钉,分别作为参考电极、记录电极和地极。3 d后,将清醒状态下的豚鼠固定于自制多功能头身一体化固定台面上,银—氯化银电极连接于豚鼠体表的不锈钢螺钉上,采用RETI-port系统(Roland Consult,德国)分别记录不同空间频率和不同颜色下的图形视觉诱发电位。结果 植入电极后,在无出血感染条件下,实验豚鼠生存时间与正常豚鼠没有明显区别。在其清醒状态下可以记录到豚鼠的PVEP波形,呈NPN形状。空间频率对PVEP波形有明显的影响:随着空间频率的增加,N1、P1波的潜伏期都有不同程度的延长,当空间频率大于0.5 cpd时,潜伏期延长明显;随着空间频率的增加,振幅降低。在不同对比度(97%、60%、30%)下,P1波的振幅随着对比度的增加而提高,且任意两个对比度之间P波振幅的差异均有统计学意义(P<0.05)。在97%和60%的对比度下,潜伏期差异无统计学意义(P>0.05)。不同颜色图形对PVEP波形也有一定的影响,黑白和红绿引出的潜伏期和振幅比较明显,与红蓝和蓝绿比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。当通频带为5~50 Hz时,引出的波形受干扰比较小,波形比较稳定。麻醉对PVEP记录影响较大,速眠新麻醉条件下记录不到PVEP波形,但对闪光视觉诱发电位记录影响不大。结论 本研究建立了一种植入式电极记录清醒豚鼠PVEP方法;豚鼠PVEP波形记录与刺激和记录参数密切相关,在高对比度(97%)、窄通带(5~50 Hz)、适当空间频率(小于0.5 cpd)下可以记录稳定的PVEP波形。

【关键词】  图形视觉诱发电位;颅骨植入电极;豚鼠

视觉诱发电位(visual evoked potential,VEP)主要是视觉刺激引起的视皮层神经元电活动,其中图形视觉诱发电位(pattern VEP,PVEP)与视网膜对图像的识别密切相关,与人的视力密切相关,且图形比较稳定,因此被广泛用于临床。而闪光视觉诱发电位(flash VEP,FVEP)个体间变异较大,多用于PVEP无法记录或记录不到的情况。常用的实验动物如小鼠和大鼠形觉功能较差,很难记录到明显和稳定的PVEP,多采用FVEP指标进行观察。而豚鼠形觉功能较好,能够诱发出PVEP,但是采用皮下电极记录振幅较低,且重复性不好,因此记录比较困难[1]。有关动物PVEP的研究比较少,van der Marel等[2]发现恒河猴在麻醉状态下,不能记录到明显的PVEP图形,其清醒状态下的PVEP才能同光刺激产生的电位区分开来,且随着麻醉深度的加深,脑电图的高频波逐渐消失,由此可知,诱发电位也会受到麻醉状态的影响。豚鼠作为一种重要的实验动物,已经被广泛地应用于传染病学、药理学以及内耳疾病等方面的研究,但在眼科学领域应用相对较少,有关豚鼠视觉电生理学方面的研究则更少[3-4]。借鉴植入电极记录大鼠VEP的经验[5],我们建立了在颅骨植入电极且在清醒状态下记录豚鼠的方法,为今后的应用研究奠定基础。

    1  材料与方法

    1.1  实验动物  健康成年雄性豚鼠15只(第四军医大学实验动物中心提供) ,体重220~300 g,外眼和检眼镜查屈光间质清晰,眼底无改变。予以12 h明暗交替光照,不限食水,在18℃~23℃条件下饲养。

    1.2  实验方法

    1.2.1  电极植入方法  1%戊巴比妥按1.5 ml/kg腹腔注射麻醉后,将豚鼠呈俯卧位固定于手术台上,四肢及头部固定牢固,弯剪除去头顶周部皮毛,直至露出皮肤,用碘氟、75%的酒精依次消毒皮肤,沿头颅矢状缝剪开皮肤2 cm,根据Goksoy等[6]介绍的豚鼠脑功能定位图进行电极固定,在前囟(Bregma)前6 mm以及后10 mm分别做参考电极和记录电极,头顶正中做地极。缝合皮肤,放回饲养笼单独饲养,于术后第1、第3天消毒切口处。为了减轻麻醉的影响,3 d后进行实验。实验完成后,对豚鼠进行饲养并观察7 d,以便观察植入电极对豚

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