|
沈阳地区不同人群HCV感染及HCV基因型分布研究 |
| |
地区分布、临床表现、治疗及转归可能具有某种相关性。为了解沈阳地区不同人群中HCV感染状况及HCV基因型分布情况，为今后本地区HCV疫苗的研制和临床治疗等提供依据，我们于1991年10月～1996年6月对本地区正常人群及不同类型肝病病人血清抗-HCV及HCV基因型分布进行研究，结果报告如下。
材料与方法
一、研究对象：3 902例血清标本分别采自中国医科大学附属第二临床医院门诊健康体检者、血库献血员及住院患者。其中大学师生475人，男243人，女232人，平均年龄23.6岁(16～54岁)；妊娠妇女1 772人，平均年龄25.8岁(22～36岁)；医务人员688人，男174人，女514人，平均年龄37.6岁(22～71岁)；正常献血员423人，男300人，女123人，平均年龄28.2岁(20～43岁)，以上人群血清ALT均正常，并无输血史。122例输血后肝炎及92例散发性肝炎(病原学检查均除外HAV、HBV、EB病毒及巨细胞病毒感染)、28例HA、181例HB、21例肝炎后肝硬化(除外HBV感染)的诊断符合1990年8月卫生部颁发的《中华人民共和国传染病防治法规定管理的传染病诊断标准》。100例原发性肝细胞癌病人依据B超、核磁共振和甲胎球蛋白定量等诊断，其中25例经病理证实。并选择104例无输血及血制品史非肝病病人做为对照组。收集血清标本-70℃冰箱保存，统一检测。
二、HCV基因分型引物：HCV Core基因区分型PCR引物由中国科学院上海生物工程研究中心合成，其核酸序列如下：
型共同性引物： P1正义链5′-CGCGCGACTAGGAAGACTTC-3′(nt 139～158)；P2反义链5′-ATGTACCCCATGAGGTCGGT-3′(nt 391～410)。
型特异性引物：P3正义链5′-AGGAAGACTTCCGAGCGGTC-3′(nt 148～167)；P4反义链5′-TGCCTTGGGGATAGGCTGAC-3′(nt 185～204)(HCV-Ⅰ)；P5反义链5′-GAGCCATCCTGCCCACCCCA-3′(nt 272～291)(HCV-Ⅱ)；P6反义链5′-CCAAGAGGGACGGGAACCTC-3′(nt 302～321)(HCV-Ⅲ)；P7反义链5′-ACCCTCGTTTCCGTACAGAG-3′(nt 251～270)(HCV-Ⅳ)。
三、检测试剂：
1.抗-HAV IgM、乙肝血清学标志物、抗-HCV检测试剂盒由台湾龙华生物科技公司提供，抗-HCV试剂盒为第二代产品，包被的抗原为C100-3、C33c、C22抗原。
2.PCR-HCV检测试剂盒由温州伊利康生物技术有限公司提供。
3.HCV基因分型所用逆转录酶(AMV-RT)、Taq酶、RNA酶抑制剂(RNasin)均为Promega公司产品。
四、检测方法：
1.抗-HAV IgM、乙肝血清学标志物和抗-HCV应用ELISA方法检测，HCV RNA应用RT-PCR法检测，检测及结果判定均严格按试剂说明书进行。
2.HCV基因分型法：参照Okamoto〔2〕引物特异PCR法并加以改进。主要步骤为①提取血清总RNA；②逆转录合成cDNA后即接以HCV型共同性引物行第一轮PCR扩增；③以HCV型特异性引物行第二轮扩增；④以6%聚丙烯酰胺凝胶电泳分析PCR终产物，HCV-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型的扩增产物长度分别为57bp、144bp、174bp及123bp。
结 果
一、不同组正常人群抗-HCV阳性率：大学师生、妊娠妇女、医务人员及献血员抗-HCV阳性率分别为0.42%(2/475)、0.96%(17/1772)、0.58%(4/688)及1.66%(7/423)，各组间比较经χ2检验差异均无显著性(P>0.05)。
二、各类肝病病人抗-HCV阳性率：除甲型肝炎外，各类肝病病人抗-HCV阳性率与104例无输血或血制品史的非肝病病人比较差异均有显著性(P<0.01)，输血后肝炎(除外HAV、HBV、EBV、CMV感染)抗-HCV阳性率显著高于散发性肝炎(除外HAV、HBV、EBV、CMV感染)(P<0.01)见表1。
上一页 [1] [2]
上一个医学论文： 山东省丁型肝炎病毒感染调查研究
下一个医学论文： 乙型肝炎病毒宫内传播机制的分子流行病学研究
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文