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三种宫内发育迟缓大鼠模型方法的比较

GR的发病机理及产前药物干预方面,因此多采用在分娩前剖腹取胎盘及胎仔研究的方法,而儿科研究IUGR生后的远期影响则需要获取活产的IUGR动物,故本文采用自然分娩取得仔鼠的方式,以相同的实验室条件、相同的参加人员同时开展了下述三组实验,并对其进行比较,结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物
  由中山医科大学动物实验中心提供的Sprague-Dawley大鼠,于发情期将雌、雄大鼠各1只合笼过夜,次晨作阴道拭子涂片,以显微镜下检出精子之日定为受孕第1天。27只孕鼠分成对照组、子宫动脉结扎组、更生霉素腹腔注射组、被动吸烟组共4组,其中对照组12只,余各组均5只。
1.2 方法
1.2.1 对照组 孕鼠单独笼养,置于室温25℃左右,通风、安静的环境,饲料、水供应充足,直至自然分娩。以下各组饲养方法亦同。
1.2.2 子宫动脉结扎组 参照Terry Hagashi等[2]的Wigglesworth改良法,于孕第17天以乙醚吸入麻醉后,从下腹正中作纵行切口,暴露子宫,以温生理盐水纱布保护子宫,寻找到子宫角动脉,在结扎处并行置一0号钢丝,一并结扎子宫动脉和钢丝,然后将钢丝轻轻抽出,远端动脉即可见血液充盈,但充盈程度不及近端。结扎双侧子宫角动脉后关腹,腹壁肌肉注射青霉素G 1 000 IU/g体重。继续饲养至分娩,分娩后1周处死并解剖母鼠。
1.2.3 更生霉素腹腔注射组 参照张为远等[3]的方法,在孕第10天腹腔注射更生霉素,剂量0.1 μg/g体重,继续饲养至分娩。
1.2.4 被动吸烟组 确定妊娠第2天开始进行被动吸烟,方法为将孕鼠连笼置于特制的半封闭木箱(长、宽、高为46cm×38cm×28cm)中,侧面相对各留一通气口,以羊城牌香烟点燃置箱中,每天分别于9Am,12Am,2pm,4pm各进行一次,前10 d每次燃1支香烟,后10 d每次2支,共20 d,后待其自然分娩。
   以上4组孕鼠分娩后,即称量鼠仔体重,部分仔鼠进行解剖称量脏重。

2 结果

2.1 产仔情况
  除结扎组1鼠未分娩、更生霉素组1鼠孕期死亡外,各组孕鼠分娩时间均在受孕后第22~24天内。对照组共产鼠仔140个,平均体重为6.268 g,以此平均体重减两个标准差得5.144 g为界定IUGR的标准。各组的仔鼠数目、体重、IUGR发生率及围产期死亡率(包括死产或生后24 h内死亡,不包括宫内死胎者)等,详见表1。
2.1.1 IUGR发生率 三个实验组中,以被动吸烟组产仔最多,更生霉素组次之,结扎组最少。实验组的仔鼠平均体重均较对照组轻,差别均有显著性意义(P<0.01),其中尤以被动吸烟组最明显,甚于更生霉素组及结扎组,但无统计学意义(t=1.324及1.420,P>0.05)。实验组每组同样5只孕鼠,获得的IUGR仔鼠分别为37,19,5只。IUGR发生率以被动吸烟组最高(与更生霉素组比较,u=1.774,P>0.05;与结扎组比较,u=2.253,P<0.05),更生霉素组次之,结扎组最低(与更生霉素组比较,u=0.776,P>0.05)。
2.1.2 围产期死亡率 围产期死亡率在实验组中以被动吸烟组最低,更生霉素组次之(与被动吸烟组比较,u=1.459,P>0.05),结扎组死亡率最高(与被动吸烟组及更生霉素组比较,u=4.795及3.079,P<0.01)。结扎组的母鼠产后约一周均作剖腹检查,可见4只母鼠的子宫内有死胎机化吸收现象,其中一孕鼠于预产期后7 d仍未分娩剖腹见全部12只胎鼠均为死胎已机化。

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