7种中草药抗菌作用实验研究

　　【摘要】 　　目的：探讨凤颈草等7种中草药对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、绿脓杆菌、白色念珠菌等13种菌株的抑菌作用，为进一步开发中药新药奠定基础。方法：采用中药抗菌试验试管法测定药物的最低抑菌浓度。结果：①凤颈草、蝙蝠葛根、黄花草、靛沫花、天青地白、天泡果、紫丁香、对白色念珠菌、新型隐球菌具有强抑制作用③凤颈草、蝙蝠葛根等对肠杆菌科各菌种具有强抑制作用。结论：7种中药对各菌株均有不同的抑制作用。

　　【关键词】 抑菌作用 最小抑菌浓度(MIC) 中药抗菌效价

　　多年来,中草药在感染性疾病中发挥重要作用。中草药成分复杂，作用机理广泛。据近年研究报道，其抑菌作用主要机理为干扰细胞壁合成;损伤胞浆膜;影响细胞蛋白合成;影响核酸合成，干扰遗传密码复制等。中药在逆转细菌、真菌等耐药方面显示出广阔的应用前景，本文以中药抗菌实验试管法研究凤颈草，蝙蝠葛根等7种中草药抑菌作用。

　　1 实验材料

　　1.1 实验菌种：标准菌种：13种。实验前对菌种进行了形态，染色性，生化反应和抗原性鉴定。

　　1.2 实验中药：凤颈草、蝙蝠葛根、黄花草、靛沫花、天青地白、天泡果、紫丁香等7种鲜品中药制成100%中药浸液，调pH值为7.6。

　　1.3 肉汤培养基，以下简称“肉汤”。

　　2 实验方法

　　本实验采用中药抗菌实验试管法，参考了有关文献[1-5]，并根据我们多年来的经验做了适当的改进，将上述中药各称取20g，加入5倍量无菌蒸馏水，浸过中药液面，放置4℃水箱内24小时后，以文火煮沸30分钟，过滤后，继加5倍量蒸馏水，文火煮沸30分钟后，再次过滤。将2次过滤后药液混合，在文火上浓缩至20ml，即为100%中药原液。调pH值为7.6。

　　中药抗菌实验，实验方法列于表1。按表1所示。将中药原液以蒸气高压灭菌8磅20分钟灭菌后即为实验药液。用按种环分别将金黄色葡萄球菌，绿脓杆菌，变形杆菌，肺炎球菌，大肠埃希菌，伤寒杆菌，乙型付伤寒杆菌，志贺氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌，宋内氏痢疾杆菌，乙型溶血性链球菌，白色念珠菌、新型隐球菌等13种细菌，分别接种于琼脂斜面培养基，37℃培养24小时，传种于无菌肉汤培养基中经18小时，再传种于无菌肉汤培养基中经6小时培养后，用前将菌液浓度1：1000稀释。取无菌试管1100支，分11组，每管加肉汤培养基1ml，第1管加所试药液混匀后，使1-9管均含有倍比稀释的药液。(即1:4，1:8，1:16，1:32，1:64，1:128，1:256，1:512，1:1024。第1、2、3、4、5、6、7、8、10管每管加菌液0.05ml，加完上述各种实验材料充分混匀后，经过37℃培养24小时，观察实验结果。药液对照管以第9管无细菌生长，菌液对照管第10管有细菌生长，实验方为有效。以抑制试验菌生长的药液最高稀释度为该中药对该试验菌的抗菌效价。以能抑制试验菌生长的最高稀释度为最低抑菌浓度MIC。表1 中药抗菌试验注(略)：菌液为6小时肉汤培养物，1:1000稀释：混匀后37℃培养18-24小时后观察结果。

　　3 实验结果

　　见表2表2 7种中药抗菌作用的对比(略)注：表内数字代表抗菌效价，以能抑制试验菌生长的最高稀释度为最低抑菌浓度MIC。如64表示将100%中药浸液稀释成1:64时该药的MIC为64，该药仍具有抗菌作用。

　　4 讨论

　　近年来细菌、真菌感染已渐趋增多，迫切需要高效、低毒的抗菌药物，由于细菌属于原核细胞，真菌细胞属于真核细胞，寻找药物仅对病原菌有毒性而不累及宿主细胞是困难的，真正能有效用于临床的抗菌化学合成药物极为有限，如万古霉素、两性霉素类因毒副作用较大等原因，在临床上的应用受到限制，加之抗生素的不合理使用，很易出现耐药性，面对这一严峻现状,发挥中药的治疗优势将成为重要课题。天然耐药株不断增加，因此从天然药物中寻找低毒高效的抗菌药物就更显重要，我们应用实验室各菌种进行中药的筛选，结果显示:凤颈草、蝙蝠葛根、紫丁香、黄花草、靛沫花、天泡果、天青地白、等7种中草药对金黄色葡萄球菌、变形杆菌、肺炎球菌、绿脓杆菌、大肠埃希菌、伤寒杆菌、志贺氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、宋内氏痢疾杆菌、乙型溶血性链球菌、乙型付伤寒杆菌、白色念珠菌、新型隐球菌等13种菌株均有抑制作用，但此7种中草药对伤寒杆菌、志贺氏痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、宋内氏痢疾杆菌具有较强抑制作用，抑菌浓度在64-128之间;金银花、忍冬藤、五倍子、地锦草、马勃、黄连等对金黄色葡萄球菌、肺炎球菌、乙型溶血性链球菌有强抑制作用，抑菌浓度在64-128之间

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