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地塞米松对SUNE

朱振宇 邓诣群 戴克胜 张清秀 马润泉

  摘 要 目的:以K562细胞为阴性对照,观察SUNE-1和B95-8两种含EBV-BHRF1基因的肿瘤细胞株在2×10-6 mol/L地塞米松(dexamethasone, DEX)作用18 h后,细胞内EBV-BHRF1基因转录水平的改变。方法:细胞RNA的提取、RNA的点杂交(Dot blot)及反转录PCR(RT-PCR)。结果:上述两种肿瘤细胞在2×10-6 mol/L地塞米松作用18 h等诱导细胞凋亡的条件下,细胞内EBV-BHRF1基因的转录水平(mRNA)明显提高。结论:本结果初步显示EBV-BHRF1基因的转录与宿主细胞抵抗凋亡的关系密切。
  主题词 地塞米松;爱泼斯坦-巴尔病毒;基因表达调控,病毒

Dexmethasone affects EBV-BHRF1 transcription
levels of SUNE-1 and B95-8 cell lines

ZHU Zhen-Yu,DENG Yi-Qun, DAI Ke-Sheng, ZHANG Qing-Xiu, MA Jian-Quan
Department of Biochemistry, Sun Yat-sen University of Medical Sciences, Guangzhou (510089)

  Abstract AIM: To observe the changes of EBV BHRF1 transcription levels of SUNE-1 and B95-8 cell lines cells incubated with 2×10-6 mol/L Dexamethasone (DEX) for 18 hours at 37℃ using EBV-BHRF1 negative K562 cell line cell as contrl. METHODS:Extraction and detection RNA by Dot blot combined with RT-PCR. RESULTS:EBV-BHRF1 transcription levels of SUNE-1 and B95-8 cell lines cells arise significantly after incubated with 2×10-6 mol/L DEX for 18 hours at 37℃. CONCLUSION:EBV-BHRF1 gene s transcription is closely related with suppression of its host cell s apoptosis.
  MeSH Dexamethasone; Epstein-Barr Virus; Gene expression regulation, virus

  细胞凋亡(apoptosis),也称程序性细胞死亡(programmed cell death, PCD),是目前活跃的研究领域之一[1]。EB病毒(epstein-barr virus, EBV)属于单纯疱疹病毒Ⅳ型,与人类的多种疾病密切相关,例如以珠江流域为高发中心的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)、在非洲高发的伯基特淋巴瘤及传染性单核细胞增多症等[2]。有报道认为EBV的BHRF1基因产物与Bcl-2有38%同源性,在细胞内的定位也相似,具有抑制宿主细胞凋亡的作用[3]。本室根据EBV全基因序列设计印物[4],用PCR方法证实了人低分化鼻咽癌(SUNE-1)细胞株,B95-8细胞株中含有EBV-BHRF1全基因片段(592 bp),并证实适当浓度的EBV-BHRF1反义寡核苷酸片段能够诱导无血清培养的低分化鼻咽癌(SUNE-1)细胞株发生凋亡[5]。本研究用前文[6]PCR扩增获得的EBV-BHRF1产物为模板,用[32?P]-dCTP标记合成探针,用点杂交(Dot blot)及RT-PCR方法检测SUNE-1和B95-8这两种肿瘤细胞株在2×10-6mol/L在地塞米松作用18 h,即常规诱导细胞凋亡的因素作用下,宿主细胞中EBV-BHRF1基因转录水平的改变,初步探讨该基因的活动情况与宿主细胞抵抗凋亡的关系。

材料与方法

  一、材料:
  1.缺口翻译(同位素探针

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