【摘要】 目的 研究近远端不同部位的胆管恶性肿瘤所导致的梗阻性黄疸肝脏不同病理改变。方法 选择近端胆管恶性肿瘤导致梗阻性黄疸67 例，远端胆管恶性肿瘤所致梗阻性黄疸54 例，手术留取未解除梗阻时的肝脏病理标本，采用免疫组化的方法显示TNF在肝脏中的表达，同时采用Sample-pci图像分析系统进行半定量分析。结果 TNF免疫组化染色显示肝脏细胞中存在大量阳性细胞，阳性细胞半定量分析可见，远端胆管恶性肿瘤梗阻性黄疸光密度值明显高于近端胆管恶性肿瘤梗阻性黄疸光密度值。结论 TNF是梗阻性黄疸中重要的致病因子，其在梗阻性黄疸肝脏中的表达程度与梗阻部位有密切关系。
【关键词】 梗阻性黄疸;TNF;免疫组化;半定量分析
Comparative Study of Obstructive Jaundice Caused by Different Partsof Carcinoma of Bile DuctWEI Jichao，LI Chunyou，LI Sen(The Hepatobiliary Department of Weifang Peoples Hospital of Shandong，Weifang 261042 China)Abstract：Objective To study pathological changes of the hepatic cell in obstructive jaundice caused by carcinoma of bile duct. Methods Immunohistochemistry showed the expression of TNF in the liver while using Sample-pci image analysis system for semi-quantitative analysis. Results There are lots of positive cells in immunohistochemistry and the optical density is different between the two types of carcinoma. Conclusions TNF is the important pathogenic factor in obstructive jaundice and is closely related to the degree of obstruction site.
Key words:obstructive jaundice; TNF-α; immunohistochemistry; semi-quantitative analysis
梗阻性黄疸(Obstructive Jaundice， OJ)是肝胆外科中常见的疾病，可对机体多个脏器产生损害，其致病机理涉及多种细胞因子与化学因子的参与，近几年研究表明，TNF-α是导致肝脏病理改变的关键因素。本研究通过观察不同部位梗阻性黄疸中TNF的表达情况，并探讨其机制从而指导临床工作。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 标本 收集潍坊市人民医院2000—2009年梗阻性黄疸手术病人未解除梗阻时肝脏标本121 例，胆总管近端梗阻67 例，男性45例，女性22 例，年龄52～79 岁，平均年龄62.3 岁，临床表现无痛性进行性黄疸，尿黄，大便发白，术前总胆红素为171～328 μmom/L,平均257 μmom/L;胆总管远端梗阻54例，男性36 例，女性18 例，年龄48～78岁，平均年龄59.1 岁，临床表现无痛性进行性黄疸，尿深黄，陶土样便，术前胆红素201～471 μmom/L，平均313 μmom/L。
1.1.2 试剂 鼠抗人TNF-α单克隆抗体购自北京中山生物技术有限公司，DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术开发有限公司。
1.1.3 仪器 Sample-pci图像分析系统，产自美国，OLYMOUS，BX50,PM-20,产自日本。
1.2 方法
1.2.1 免疫组织化学检测
常规二甲苯脱蜡，TNF-α采用胰酶修复。每张切片加内源性生物素阻断试剂盒中的试剂A和B，新配制的3%H2O2甲醇溶液孵育10 分钟，以阻断内源性过氧化物酶活性。0.5%小牛血清白蛋白封闭非特异性抗体， 加入一抗和二抗及链霉菌生物素蛋白——过氧化酶。DAB溶液显色，常规脱水、透明，中性树胶封片。所用PBS为1
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