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中国医科大学附属第二医院妇产科一氧化氮与盆腔沙眼衣原体感染的关系 |
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王跃红 杨天宇
近年来，妇女生殖道沙眼衣原体(chlamydia trachomatis, CT)感染的发病率不断上升［1］，可导致不孕或异位妊娠。为了解其感染的免疫机理和致病机理，国外学者通过动物实验证实，细胞介导的免疫反应在控制CT感染中起关键作用［2］。本研究对输卵管性不孕患者和输卵管结扎术后患者的部分输卵管组织行CT-DNA检测及病理学检查，并测定血清及盆腔液中一氧化氮(NO)及γ-干扰素(IFN-γ)的水平，寻求NO与女性盆腔CT感染的关系。
一、资料与方法
1.研究对象：1997年8月至1998年1月在我院妇科就诊不孕两年以上、经盆腔检查及输卵管碘油造影检查证实为输卵管堵塞的患者，21例；输卵管结扎术后行再通术者9例。平均年龄(30.0±3.8)岁，均无恶性肿瘤、糖尿病、高血压、自身免疫病、其他感染性疾病，无近期服用硝酸盐类药物史。根据Ruijs等［3］所制定的标准，即术中检查存在输卵管、卵巢周围粘连、输卵管积水，及因此引起输卵管梗阻者，诊断为盆腔炎。
2.方法：(1)输卵管组织标本采集：对输卵管性不孕患者在行腹腔镜下粘连分离或造口术时切取3 mm输卵管组织；对拟行输卵管再通术患者在开腹手术中，于结扎瘢痕处切取相同大小的输卵管组织。将组织块切成两段，一段置盛生理盐水的无菌试管中，-20℃冰箱保存，另一段置10%中性甲醛液中固定。(2)血清标本采集：手术前一日上午9时取肘正中静脉血2 ml，4℃、3 000 r/min离心15分钟，取上清液分装于两个试管内，置-20℃冰箱保存。(3)盆腔液采集：手术进入腹腔后立即抽取盆腔液4 ml，处理方法与血清相同，分装于两个试管内，置-20℃冰箱保存。(4)输卵管组织CT-DNA检测：使用套式聚合酶链反应(PCR)技术检测，试剂盒由无锡市克隆遗传技术研究所提供，于405 bp处出现荧光光带者为CT-DNA阳性。(5)血清及盆腔液中NO检测：使用酶法检测NO，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。此方法利用硝酸还原酶特异地将NO3-还原为NO2-，通过检测NO2-的浓度间接反应NO的水平。用分光光度计于550 nm、0.5 cm光处，检测反应样品的吸光度值，计算NO水平。(6)血清及盆腔液中IFN-γ的检测：采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定，试剂盒由华美生化有限公司提供。(7)组织病理学检查：将固定好的组织块石蜡包埋、切片、HE染色，光镜下观察。
3.统计学方法：采用t检验和χ2检验，相关性分析采用直线回归分析检验。
二、结果
1.30例患者输卵管组织CT-DNA检测结果：输卵管性不孕患者中13例CT-DNA阳性，阳性率62%；输卵管结扎术后患者CT-DNA阳性4例(4/9)，两者比较，差异无显著性(P>0.05)。
2.输卵管组织CT-DNA阳性与阴性患者的血清及盆腔液中NO测定结果：以输卵管组织CT-DNA阳性与否分别观察，CT-DNA阳性者血清NO水平明显高于CT-DNA阴性者；两者的盆腔液NO水平无明显差异。见表1。
表1 输卵管组织CT-DNA阳性与
阴性患者血清及盆腔液中NO
测定结果(μmol/L, ±s)
输卵管
组织
CT-DNA 血清 盆腔液
例数 NO 例数 NO
阳性 17 47.5±5.8 13 26.9±2.4
阴性 13 21.6±1.4 11 28.4±6.3
P值 <0.01 >0.05
注：有6例盆腔液混入血液，未计在内
3.30例患者血清与盆腔液中NO和IFN-γ测定结果：盆腔液与血清中的NO、IFN-γ均呈正相关，见表2。
表2 30例患者血清与盆腔液中NO
和IFN-γ测定结果(±s)
类别 总
例
数 NO
(μmol/L) IFN-γ
(ng/L) r P值
血清
30
45.3
±5.0 42.0
±1.1 0.862 <0[1] [2] 下一页
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