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高渗氯化钠溶液对原代培养星状胶质细胞容积的影响

袁世荧 曾邦雄

摘要 目的:观察原代培养妊娠大白鼠胚胎星状胶质细胞暴露于不同浓度高渗氯化钠(NaCl)溶液后的容积变化。方法:将细胞置于0.05%、0.10%和0.25%NaCl的细胞培养基混合液15分钟、60分钟至1天和7天。对照组细胞(容积作为100)置于等渗溶液中。结果:细胞置于0.05%、0.10%和0.25%NaCl的细胞培养基混合液后15分钟,其细胞容积与对照组细胞相比无明显改变。60分钟至1天后所有细胞明显萎缩。第7天各组细胞容积重新增加,基本恢复至对照组细胞容积水平。结论:星状胶质细胞暴露于高渗溶液后具有细胞容积调节功能。
关键词 星状胶质细胞 细胞容积 高渗溶液

The effect of hypertonic NaCl saline on cell volume of cultured astrocytes in vitro Yuan Shiying,Zeng Bangxiong.Department of Anesthesiology,Union Hospital,Tongji Medical University,Wuhan 430022
Abstract Objective:Changes of cell volume in cultured astrocytes of rat embryo in vitro were observed in different concentration of hypertonic NaCl saline.Method:Astrocytes were exposured in hypertonic medium with 0.05%,0.10% and 0.25% NaCl saline for 15 minutes.Astrocytes in control group (cell volume as 100) were exposured inisotonic medium.Result:There were no significant differences(P>0.05)in cell volume between the experimental group and control group after exposured in hypertonic NaCl saline for 15 minutes.Compared with the control level,after 60 minutes and 1 day all astrocytes shrunk significantly,(P<0.05),7 days later all astrocytes swelled again and their volume were restored (P>0.05).Conclusion:Astrocytes can restore their cell volume following exposition in hypertonic saline.
Key words Astrocytes Cell volume Hypertonic saline

  对于多发性创伤及颅脑损伤伴失血性休克病人的紧急治疗,传统上习惯于3~4倍失血量的等渗晶体溶液。如此大量液体在短时间内快速输入很困难,且易因为血浆胶体渗透压的降低而导致脑水肿并伴有颅内压的升高。近年来高渗溶液(7.5%NaCl)因能够快速恢复循环血容量、改善器官灌注和微循环、降低颅内压以及减轻脑水肿而重新得到重视和进一步深入研究〔1~3〕。本实验选择原代培养的大白鼠胚胎星状胶质细胞为研究对象,观察其细胞容积在不同浓度高渗NaCl溶液中的变化。

材料与方法

  1.细胞培养 将妊娠18~20天的大白鼠用乙醚处死。剖腹取出胚胎,取出脑组织,在显微镜下分离脑半球,取海马区域沿皮质方向的组织。所取组织在37℃的胰蛋白酶溶液中浸泡15分钟,以化学解离细胞间的连接。用Hank′s缓冲液洗涤三次,用吸管用力来回吸挤数次,机械破坏细胞间的连接,直到无明显肉眼可见的组织块。所得的细胞悬浊液加入35mm的细胞培养皿中,每培养皿约500 000~800 000细胞。星状胶质细胞种植于培养皿的底部,用MEM-HS培养,每周更换一次。所有细胞培养于37℃5%CO2培养箱中。
  2.不同浓度高渗溶液环境的模拟 用不同量的7.5%NaCl溶液与新鲜MEM-HS混合,使混合液中的NaCl浓度分别为0.05%、0.1%

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