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经子宫颈冲洗宫腔收集滋养细胞进行产前性别诊断初步研究 |
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洗的滋养细胞PCR扩增阳性12例,阴性5例;绒毛组织PCR扩增12例阴性中,其宫腔冲洗的滋养细胞PCR扩增12例全部是阴性。PCR诊断性别的灵敏度为70.6%,假阳性率为0。 3 讨论 3.1 1971年Shettles[3]报道胎儿滋养细胞可从胎盘脱落至子宫颈管,并通过分析宫颈管内细胞辨别胎儿性别获得成功。以后相继有作者[4~6]利用经宫颈取细胞(tanscervical cells,TCCs)进行产前诊断。目前取材方法有:(1)子宫腔或子宫颈管冲洗法;(2)子宫颈管宫颈粘液吸出法;(3)子宫颈管细胞刷落法。1995年Rodeck等[7]比较了不同方法经宫颈收集滋养细胞,结果表明,子宫腔冲洗法取标本成功率最高,而吸出法和刷落法似乎较冲洗法更为安全。我们采用子宫腔冲洗法收集滋养细胞,共取材85例,回收到含滋养细胞的冲洗液64例,取材成功率仅为75.3%,分析其原因可能由于实验初期缺乏冲洗经验,或者未冲洗到绒毛部位所致。 3.2 滋养细胞如何到达子宫腔及子宫颈管的确切机制还不十分清楚。Rhine等[8]认为,妊娠囊在宫腔内被绒毛所覆盖,当除胎盘以外的绒毛开始退变为滑泽绒毛膜时,滋养细胞会脱落于子宫腔。有学者[7]认为滋养细胞是靠其侵袭能力穿过包蜕膜到达宫腔的,并认为此时包蜕膜也出现退变,故滋养细胞易于侵出。究竟滋养细胞何时何途径到达子宫腔内,其生物学意义怎样,有待进一步深入研究。 通过冲洗宫腔收集滋养细胞进行产前诊断,国内尚未见报道。国外虽有一些研究,但有关冲洗宫腔收集滋养细胞的最佳时间亦有争论。从理论上讲,包蜕膜下的绒毛在未完全退化为滑泽绒毛膜之前,即于孕早期,只要能回收到冲洗液,就应收集到滋养细胞。实验结果表明,回收液体的难易与孕龄无明显关系,且实验后期,随着取材技术的熟练,取材成功率有所提高。 3.3 本实验收集含有滋养细胞的宫腔冲洗液64例中,35例经细胞遗传学方法检查,即用0.05%阿的平作荧光染色,于荧光显微镜下查Y小体。同时以人工流产术后的绒毛组织作染色体核型分析作为对照,灵敏度为66.7%,假阴性率33.3%,假阳性率为5%,除实验本身操作失误导致细胞丢失以外,Y小体并非出现于所有男性细胞中亦是原因之一。因此,单凭Y小体判定胚胎性别容易误诊,应同时行X染色质检查,以提高诊断的准确性。
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