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哮喘豚鼠内皮素 心钠素含量的变化及心钠素对内皮素含量的影响 |
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ma group after ceasing to infuse rANF for guinea pigs for 30 minutes. CONCLUSION: ET-1 might play an important role in the pathogenesis of asthma.ANF might inhibit production of ET-1.
［MeSH］ Asthma; Endothelins; Atrial natriuretic factor; Guanosine cyclic monophosphate
内皮素-1(endothelin-1,ET-1)是由内皮细胞合成和释放的一种活性多肽，除具有强烈的血管收缩作用外， 还可促进炎性细胞的激活，致支气管痉挛及气道炎症等，在哮喘的发病中起重要作用［1］ 。心钠素(atrial natriuretic factor, ANF)主要由心房肌细胞分泌，具有扩张血管、利钠、利尿等作用。近年研究发现，ANF还有舒张支气管平滑肌的作用［2］ 。本研究旨在观察哮喘豚鼠ET-1与ANF水平变化及有无相关性，以及外源性ANF在活体中对刺激性ET-1合成与分泌有无抑制作用，可望为支气管哮喘的治疗提出新思路。
材 料 和 方 法
一、材料
卵白蛋白(sigma公司)，大鼠28肽ANF(sigma公司)，ET-1放免测定盒(北京东亚免疫技术研究所)，ANF放免测定盒(北京北方免疫试剂研究所)，cGMP放免测定盒(上海中医药科大学同位素科)。
二、哮喘豚鼠模型的复制与动物分组
(一)哮喘豚鼠模型的复制参照刘朝晖等采用的方法［3］ 选择350-450 g成年雄性豚鼠，用10％卵白蛋白生理盐水1 mL腹腔内注射，2周后将致敏豚鼠放入半密闭的有机玻璃罩内，用超声雾化器喷入1％卵白蛋白生理盐水，在雾化室中放置1 min左右，以豚鼠腹肌明显收缩为阳性。隔日诱喘1次，共5次。
(二)350-450 g雄性豚鼠44只(江苏省实验动物中心提供)，随机分入以下各组：(1)对照组：豚鼠10只，用生理盐水1 mL腹腔内注射，2周后用前法雾化吸入生理盐水。(2)哮喘组：豚鼠10只，按上述方法复制哮喘豚鼠模型。(3)哮喘+rANF组：豚鼠24只，依剂量再分A、B、C组，每组8只， 按上法复制哮喘豚鼠模型后， 用电子微量泵分别以0.5,1.0, 2.0 μg*kg-1*min-1速度输注rANF 60 min。
三、实验方法
(一)将致敏豚鼠i.p.25％乌拉坦(1.2 g／kg)麻醉，分离一侧颈动脉并插管，置入雾化室中雾化吸入1％卵白蛋白生理盐水5 min左右，出现哮喘症状后5 min取颈动脉血经处理后待测ET-1、ANF和cGMP。在给气管插管后注入生理盐水10 mL， 反复抽吸3次，将抽取的支气管肺泡灌液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)低温离心(2 000 r/min，15 min)后取上清液待测上述指标。对照组也用上法采集标品待测。
(二)哮喘+rANF组豚鼠按上法诱发哮喘后，立即经大隐静脉建立输液通道。用电子微量泵分别以0.5, 1.0, 2.0 μg*kg-1*min-1速度输注rANF 60 min。rANF输注完毕30 min后采集样品的方法同上。
四、测定样品中ET-1、ANF、cGMP含量。
五、实验数据以±s表示，采用t检验、方差分析及回归相关分析处理数据。
结 果
一、对照组和哮喘组豚鼠血浆及BALF中ET-1、ANF、cGMP含量(表1)
表1 对照组和哮喘组豚鼠血浆及
BALF中ET-1、ANF、cGMP含量
Tab 1 Levels of ET-1、ANF and cGMP in plasma and BALF
of the control group and the asthma group (±s. n=10)
Group ET-1 (ng/L) ANF (ng/L) cGMP (nmol/L)
Control
Plasma 200.0±47.0 89.0±17.7 2.1±0.6
BALF 18.5±3.8 49.5&上一页 [1] [2] [3] 下一页
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