|
幽门螺杆菌工程疫苗研究进展 |
| |
|
T-B较CT-B拥有更可靠的安全性和有效性，Michertietal[12]在临床实验了重组HpUre和LT口服免疫Hp染的志愿者的安全性和免疫原性，结果发现治疗患者仅出现腹泻等，较少的副反应；而使用脱毒LT(如LTK63)可避免以上副反应．LTK63与LT区别在于丝氨酸取代了第63位的赖氨酸，LTK63作为粘膜佐剂在动物模型上已成功诱导抗原特异的体液免疫反应和风疹病毒特异的毒性淋巴细胞反应，因此LTK63作为佐剂完全可能在未来临床中用于Hp治疗性免疫。最近Kinetal[13]采用聚微囊包襄的全菌抗原口服免疫小鼠同样可诱导小鼠产生强烈的系统和粘膜免疫，免疫8wk后，胃肠液中抗HPslgA和血清lgG仍维持较高平，Hp菌攻击小鼠保护率高达95％，与CT，LT佐剂组对比无显著差异，表明聚微襄颗粒可以诱导针对Hp特异系统和粘膜免疫，并且可以作为未来Hp疫苗的佐剂。3关于疫苗蛋白质分子的空间结构及抗原表位预测抗体分子在抗原上的结合位点称为抗原决定簇(determinant)，又称抗原表位(epitope)．它是蛋白质的表面性质，常出现在分子的高暴露区域，其性质、数目及空间的构型决定其抗原特性，为精确描述抗原决定簇，可用同源蛋白质来评价特定氨基酸替换的影响以确定抗原表位的所在区，不过这里的表位是指“功能表位”，即一种蛋白质能在免疫检测中结合抗体的那一部分或片段、因此研究某种蛋白质有意义的亚单位结构和功能，它在实验使用上有买际意义。利用计算机软件可以预测蛋白质的空间结构和抗原位点，这可作为抗原多肽合成试验的选段参考，适当左右扩展成10～ 20肽，也可用作抗原克隆表达实验前PCR引物设计时模板范围选择的参考，使扩增出的序列能够覆盖较多的预测点，这对我们研制Hp基因工程疫苗有重要指导意义。4Hp疫菌的免疫保护机制免疫应答类型的确定直接决定人类疫苗学研究发展，Hp感染的免疫应答类型很难确定，这是因为自然感染Hp后，引起的免疫反应无保护性；而感染Hp的啮齿类动物，采用经典免疫学技术很难分析疫苗的治疗性免疫应答机制[14]．最近有报道在Hp感染者胃粘膜中slgA水平明显高于对照组，提示粘膜slgA在抗Hp感染中具有重要作用，Doigeetal用Hf超声裂解物免疫小鼠，发现抗螺杆菌slgA水平与保护作用密切相关．T淋巴细胞在Hp感染中的保护作用目前知之甚少．Hp感染患者外周血单核细胞的刺激和抑制作用已有报道，Hp感染的小鼠和人类，THI细胞被抑制，小鼠的保护性免疫与THI细胞抑制和TH2细胞活化密切相关[15，16]．目前Hp疫苗诱导机体产生保护性免疫和治疗作用的机制仍不清楚，Ghiaraetal[9]认为疫苗可能改变胃内Thl型应答反应，转变为THO或Th2型保护性反应；并且在慢性Hp感染小鼠模型中出TH1细胞反应口服Hp菌苗诱导THO或Th2细胞活化反应，清除体内感染的细菌，Hp感染的小鼠模型研究发现Th2反应刺激程度与胃粘膜内细菌减少和胃炎消退密切相关，Hp免疫小鼠体内发现IFN-γ下清Thl反应，胃内Th2细胞分泌IL-4水平增高；体外培养Hp免疫小鼠后，发现大量脾细胞中有Hp特异Th2细胞，脾细胞接种其他动物(与对照相比)发现明显减少胃内Hp感染量．Mohammadietal[17]也发现相似结果，并证明IL-4基因敲除小鼠体内Hp感染数量明显高于对照组，目前研究表明Hp慢性感染人群Thl细胞反应占主要地位，人类胃粘膜反应是否与小鼠相同？如果类似，采用无毒粘膜佐剂，治疗性疫苗可能是清除Hp感染的新的方法[18，19]。5Hp感染的动物模型研制Hp疫苗的先决条件是必须建立合适、稳定的Hp慢性感染动物模型，以分析免疫应答和免疫保护机制．在螺杆菌属细菌中，Hf与Hp的生化特征和生物学行为最为接近，其16sDNA基因序列与Hp的同源性高达94．6％，Ure、过氧化物酶、过氧化氢酶均为阳性，生长条件相近，还具有相对较广的宿主范围，Hf在小鼠胃内的定植无明显部位特异性，与人Hp胃内定植部位基本一致，并能引起与人类Hp相关胃炎相似的病理改变．王继德博士etal(1997年)研究证实无特殊病原菌(SPF)级Balb／c小鼠对Hf易感，25只小鼠的感染成功率为100％，并能在胃内长期存活达16wk以上，用ELISA法在感染16wk以后的小鼠血清、胃肠液中可检出抗Hf-lgG抗体，并发现该抗体与Hp抗原有明显的交叉反应，这证明两种细菌有许多共同免疫原，Hp定植成功的有悉生猪、狗和无胸腺小鼠．但这些动物昂贵，需特殊饲养条件，且允许观察时间不足1mo，国内学者陈晶晶1990年最早报道了Hp的wistar大鼠模型的成功复制，但不足之处在于Hp定植时间不超过1mo．有报道用灵长类动物(如日本猴、罗猴)复制Hp模型，由于灵长类动物胃内生理结构与人类高度相似， 可望获得 上一页 [1] [2] [3] 下一页
上一个医学论文： 对尿毒症毒素的新认识
下一个医学论文： 超声内镜对胰腺肿瘤早期诊断的进展
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文