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猫脊髓后角浅层内GABA能神经终末与表达阿片 受体神经元之间的突触联系

个别散在分布的胶体金颗粒。
  与我们[12]先前的研究结果一致,猫脊髓后角浅层内MOR样免疫反应阳性产物主要分布于树突内,仅有少量的胞体及轴突呈现MOR阳性。在胞体内,阳性产物主要位于胞膜下,在胞浆内则主要位于粗面内质网的核糖体上。在树突内,阳性产物不仅出现于突触后膜下,亦分布于非突触部位的胞膜下,但前者多于后者(图1~3)。当1个神经终末内金颗粒数量大于其周围同等面积的非轴突结构内金颗粒数量的10倍以上者,则判定为GABA阳性[13]。GABA阳性轴突终末内含有多形性突触小泡,形成的突触为对称性突触(图1~3)。
  双标电镜观察发现有相当数量的GABA阳性轴突终末与MOR阳性树突或胞体形成突触连接,其中多为轴树突触,偶见轴体突触,这些突触均为对称性突触(图1~4)。在所计数的100个有明确突触关系的MOR阳性树突和胞体中,其中有32个与GABA阳性轴突终末形成突触连接。实验中未发现有MOR阳性轴突含有GABA,也未见有MOR阳性的胞体为GABA阳性。

讨  论

  MOR与吗啡的镇痛密切相关。MOR是通过与阿片类物质结合而发挥其生理效应。本研究结果表明,猫脊髓后角浅层内有约三分之一的MOR阳性的树突和胞体与GABA阳性终末形成突触连接,且全部为对称性突触。说明脊髓后角浅层内MOR神经元可能接受GABA能神经终末的抑制。以往的研究表明,脊髓后角浅层内约有70%的M-ENK阳性神经元同时含有GABA,提示M-ENK与GABA可能共存于轴突终末内[11]。此外,后角浅层神经元的膜片钳工作发现,GABA引起的氯电流可被MOR特异性的激动剂DAMGO增强[14]。因此,在伤害性刺激存在的情况下,后角浅层内GABA阳性轴突终末内的GABA可能与M-ENK一起释放,M-ENK作为内源性的吗啡类物质激活MOR阳性神经元而产生镇痛效应,而GABA可进一步增强M-ENK的镇痛效应。
  此外,值得指出的是,本实验发现约三分之一的MOR阳性树突或胞体与GABA阳性终末之间存在突触联系,提示MOR阳性神经元除与GABA能神经终末形成突触外,可能还与含有其他神经活性物质的轴突终末形成突触。后角浅层内分布有大量不同来源且含有多种神经活性物质的神经终末,如5-羟色胺,降钙素基因相关肽,血管活性肠多肽等。这些神经活性物质均与伤害性刺激信息的传递或调制有着密切关系。MOR阳性神经元与这些神经活性物质之间的突触联系值得进一步探讨。

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