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妊高征患者血清中免疫抑制性阻断活性的变化 |
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郑英如 陈竹钦 颜建华 何凤田 章蓉
中国图书分类号 R714.2
妊高征(PIH)是一种严重威胁母胎健康的妊娠并发症，其发病原因是近年来围产医学的一个重要研究方向。自本世纪初提出PIH发病与免疫有关以来，免疫失衡一直被认为是PIH 发病的一个重要原因［1］。研究表明: 血清中免疫抑制性阻断活性（ISBA）的存在是正常妊娠得以维持的一个重要因素，其水平的异常与习惯性流产、胎儿宫内死亡等密切相关［2，3］。那么PIH的发生与发展与ISBA的变化有无关系呢?目前除一些推测外，尚无直接实验证据［1］，为此，本文对这一问题进行了初步探讨。
1 材料与方法
1.1 研究对象 实验分两组，即PIH组20例，均为中、重度患者，诊断标准为全国统一标准［4］；正常孕妇组20例。两组研究对象均为初孕妇，年龄21～30岁，排除了心、肝、肾及甲状腺疾病，无糖尿病、慢性高血压、风湿、类风湿及红斑狼疮等自身免疫相关疾病史。
1.2 单向混合淋巴细胞反应(MLRs) 抽取两组研究对象及各自配偶的静脉血，部分置于非抗凝管内，用于分离血清。余者置于肝素管内，按密度梯度离心法分离淋巴细胞。 将两组研究对象的淋巴细胞调至1×106细胞/ml,并分成刺激细胞和应答细胞两部分；将各自配偶的淋巴细胞调成相同密度作为刺激细胞。将刺激细胞与终浓度为25 mg/L 的丝裂霉素C于37℃水浴中共孵育30 min，经无血清RPMI1640培养基洗涤3次后重新调成1×106细胞/ml。然后在96孔细胞培养板中进行MLRs，其中包括刺激细胞和应答细胞各0.1 ml。细胞培养于含10%研究对象自身血清或10%正常男性AB型对照血清的RPMI1640培养基中。实验中不同因素的组合情况如下： ①研究对象的刺激细胞＋自身应答细胞＋自身血清；②研究对象的刺激细胞＋自身应答细胞＋男性AB型对照血清；③研究对象的应答细胞＋相应配偶的刺激细胞＋自身血清；④研究对象的应答细胞＋相应配偶的刺激细胞＋男性AB型对照血清。于培养的第5天，每孔加入1 μCi的3H-TdR，24 h后收集细胞，测定应答细胞对3H-TdR的摄入量(以cpm值表示)。实验设3复孔，取其平均值。①、②两种组合的平均cpm值分别以P1和C1表示，③、④两种组合的平均cpm值分别以P2和C2表示。
1.3 资料处理 按Park的方法进行［3］。据如下公式计算阻断效应指数(BEI)：BEI(%)＝［1-(P2-P1)/(C2-C1)］×100%。若BEI>20%则判为ISBA阳性。对两组研究对象的ISBA阳性率进行统计学比较(采用χ2检验)。
2 结果
在20例正常孕妇中，BEI>20%者有9例，ISBA阳性率为45%。在20例PIH患者中，BEI>20%者有3例，ISBA阳性率为15%。经统计学分析，两者相差显著(P<0.05)，即PIH组的ISBA阳性率明显低于正常孕妇组。
3 讨论
血清中ISBA的存在是维持正常妊娠的重要因素之一，因其与IgG有关,故也有人称之为阻断抗体［1］。测定血清中ISBA最常用的方法就是观察单向MLRs 中应答细胞的增殖受抑程度。ISBA的评价指标有BEI、刺激指数(SI)和阻断指数(BI)，其中又以BEI作为预测妊娠能否顺利维持的价值最大。PIH作为一种严重的妊娠并发症，其发病的免疫学因素一直受到人们的广泛关注。目前人们认为PIH与习惯性流产相类似，可能也与ISBA的不足有关，只是尚缺乏直接实验证据［1］。本实验以BEI作为评价指标对PIH患者和正常孕妇血清中ISBA进行了测定和评价，结果显示PIH患者血清中ISBA 下降，这显然与前述观点相符。并且以往研究发现PIH患者患习惯性流产的机率也明显增高，这也支持上述观点［5］。至于患PIH时，血清中ISBA下降的原因尚不清楚。推测可能是由于阻断抗体IgG的产生不足所致。Steck等用配偶的白细胞刺激母体来治疗PIH引起的反复胎儿死亡取得了良好效果，其主要根据是配偶的白细胞可刺激母体产生阻断抗体，从而有效抑制母体对胎儿的排斥反应［6］。这些结果为PIH的免疫学防治研究提供了很好的启发和思路，然而，要真正弄清ISBA与PIH之间的内在联系，还需进行大量深入研究。
资金项目：本课题受国家自然科学基金资助(批准号: 39370709)
作者简介：郑英如，女，32岁，围产医学硕士，主治医师，讲师；
陈竹钦，女，教授，硕[1] [2] 下一页
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