【摘要】 目的 观察血管内皮生长因子(VEGF)在子宫内膜异位症(EMs)发生发展中的作用。方法 采用免疫组织化学SP方法检测16例EMs患者异位内膜组织(A组)、在位内膜组织(B组)中VEGF的表达，并与16例同期因子宫肌瘤行子宫切除术患者的正常子宫内膜组织(对照组)作对照。结果 A组、B组和对照组的VEGF表达率分别为93.75%(15/16)、56.25%(9/16)、25.00%(3/16)，3组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01或0.05)。结论 VEGF作为诱导血管形成的重要因子，它可直接而特异作用于血管内皮细胞，导致新生血管形成，EMs患者在位及异位内膜VEGF的高表达，提示其在发病机制中起一定的作用。
【关键词】 子宫内膜异位症;血管内皮生长因子;免疫组织化学
子宫内膜异位症(EMs)是一种妇科常见病，育龄妇女的发病率约占10%～15%，不孕妇女则高达40%～50%，且发病率呈逐年上升趋势，其发病机制尚不清楚。目前认为异位子宫内膜却具有类似于恶性肿瘤转移、种植、侵袭等生物学特性, 而此过程均依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子(VEGF)作为一种主要的血管生成因子以其促进血管内皮细胞增殖、迁移，增加微血管通透性，促进血管形成的生物学特性参与了子宫内膜生理以及病理血管生成。本研究通过检测16例EMs患者子宫内膜、异位内膜及16例子宫肌瘤患者正常子宫内膜中VEGF的表达,观察VEGF在EMs发生发展中的作用。
1 资料与方法
1.1 病例与分组
选择2006年9月至2007年11月在我院经腹腔镜或开腹手术，手术后病理检查确诊为EMs的16例患者为研究组，年龄24～48岁，分为异位内膜组(A组)及在位内膜组(B组);选择同期因子宫肌瘤行子宫切除术的16例患者正常子宫内膜为对照组，年龄35～48岁。两组患者均月经周期规则(28～30 d)，术前3个月内均未用过内分泌药物治疗，无合并其它内外科疾病。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 研究组及对照组患者均选择月经周期的卵泡期(6～14 d)取材,于术中无菌操作，研究组同时取在位及异位内膜。对照组只取在位内膜，术中立即取材,经10%(体积分数)中性甲醛溶液固定,石蜡包埋，5μm连续切片5张，1张行常规HE染色进行病理形态学观察，其余用于免疫组织化学染色。
1.2.2 主要试剂 鼠抗人VEGF单克隆抗体、SP免疫试剂盒和山羊血清、DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。
1.2.3 SP法检测VEGF 切片常规二甲苯脱蜡,梯度乙醇至水。采用SP法进行免疫组织化学染色,实验操作严格按说明书进行。阳性对照选用VEGF免疫染色阳性的组织切片，0.01 MPBS代替一抗作为阴性对照。试验步骤严格按试剂盒操作步骤进行。
1.2.4 免疫组化阳性判断标准 以细胞胞质中出现棕黄色颗粒为判断标准，按FDA推荐的染色强度分级：阴性(-);细胞无着色或阳性细胞数<5%;弱阳性(+)：细胞轻度着色呈淡黄色，阳性细胞数5%～25%;阳性()：细胞着色呈深黄色,阳性细胞数25%～50%;强阳性()：细胞明显着色，呈棕黄色，阳性细胞数>50%。
1.3 统计学处理
对数据资料进行秩和检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
结果详见表1。
表1 各组内膜VEGF的表达 (略)
3组间两两比较均P<0.01或0.05。
3 讨论
EMs真正的病因及发病机制至今未明。目前经血逆流种植学说为大家所接受，然而已知多数妇女经期均有经血逆流现象，却仅10%左右发病。因此，经血逆流可能只是发病的基础，而近来研究表明患者的内膜具有转移、种植、生长等类似恶性肿瘤细胞生物学行为的能力可能才是发病的关键。目前研究证实，恶性肿瘤的转移、种植及生长均依赖于新生血管的形成，而脱落的子宫内膜附着于腹膜或其他部位时，异位的子宫内膜及其周围组织新的血供的建立与维持，亦是子宫内膜异位种植存活和发生的基本条件。
VEGF是一种重要的选择性的促血管生成因子，以旁分泌方式作用于血管内皮细胞，促进其增殖并诱导血管生成[1]。大量的实验研究证实,几乎所有的恶性肿瘤VEGF 表达都呈较高水平，而在周围正常组织中无或仅有极低水平的表达[2]。高表达的VEGF与其相应的受体特异性结合后，诱发肿瘤血管生成;持续和
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