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大蒜素和更昔洛韦抑制巨细胞病毒所致细胞凋亡的实验研究 |
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李红 董永绥 方峰 李革
【摘要】 目的 探讨抗巨细胞病毒(CMV)药物对CMV感染所致细胞凋亡的影响。方法 将大蒜素作用于CMV感染的人胚肺成纤维细胞(HEL)，经凋亡原位末端标记检测和DNA含量流式细胞仪检测。结果 发现大蒜素用药组细胞凋亡发生率低于未用药的病毒感染对照组，但二者差异无显著意义(P>0.05)；进一步经原位分子杂交检测和图像分析发现，虽然与病毒感染组相比，大蒜素用药组HEL细胞内bcl-2基因的表达有所增加，fas基因表达减少；但与正常HEL细胞组比较，bcl-2基因的表达仍是明显减低，fas基因表达亦是明显增高的(P<0.01)。结论 大蒜素能影响CMV感染所致的细胞凋亡，但作用较弱。用同样的方法，又对比了更昔洛韦用药组，结果提示更昔洛韦能有效地抑制CMV所诱导的HEL细胞凋亡的发生。
【关键词】 巨细胞病毒属 脱噬作用 基因，bcl-2 二硫化物类 更西罗韦
The inhibitory effect of garlicin and ganciclovir on CMV-induced apoptosis in vitro LI Hong, DONG Yongsui, FANG Feng, et al. Department of Pediatrics, Tongji Hospital, Tongji Medical University. Wuhan, 430030
【Abstract】 Objective To evaluate the effect of garlicin and ganciclovir on CMV-induced apoptosis. Methods The authors detected the CMV-infected human embryonic lung (HEL) fibroblast cells after adding garlicin and ganciclovir with in situ end-labeling (TUNEL) apoptotic cell detection method and flow cytometric cell cycle analysis; they also investigated the expressions of bcl-2 and fas mRNA by means of in situ hybridization techniques and image analysis system. Results There was little change in CMV-induced apoptosis in the group of garlicin. Meanwhile, bcl-2 was upregulated and fas was downregulated compared with the CMV-infected control, but both of them were different from the normal control significantly. Conclusion The effect of garlicin on CMV-induced apoptosis was weak. Nevertheless, ganciclovir could inhibit CMV-induced apoptosis effectively.
【Key words】 Cytomegalovirus Apoptosis Genes, bcl-2 Disulfides Ganciclovir
巨细胞病毒(CMV)感染在世界范围内广为传播，至今仍缺乏安全高效的抗CMV药物。通过抗CMV药物的体外实验研究，我们筛选出大蒜素及更昔洛韦(GCV)对CMV AD169和临床分离株均有明显抑制作用。更昔洛韦作为一种化学制剂，其抗CMV作用机理已十分明确，即它被CMV感染的细胞产生的GCV-三磷酸盐(GCV-TP)诱导活化，而发挥对CMV DNA多聚酶的抑制作用。而大蒜素这一中药制剂，由于其组成成分的复杂性，使其抗病毒作用机理难以阐明。我们通过检测药物对CMV感染所致细胞凋亡的影响，以期从细胞凋亡这一角度对大蒜素的抗CMV机理加以阐述。
材料和方法
一、材料
1.细胞：自制人胚肺成纤维细胞(HEL)，取自妊娠4个月水囊引产的胚胎，经常规原代细胞培养[1] [2] 下一页
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