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商品西洋参DNA指纹图谱鉴别 |
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王培训 黄丰 周联 曹柳英 梁瑞燕
摘要：运用RAPD技术对来自不同产地的西洋参样品进行多态性分析。结果显示，大部分引物能扩增出清晰的DNA指纹图，西洋参真伪品之间的指纹图谱差别较大，而各地产西洋参DNA指纹图基本一致。同时，发现个别产地样品的指纹图有不同程度的改变，考虑有变异可能。
关键词：西洋参；随机扩增多态性DNA技术/利用；中药材鉴别
中图分类号：R282.5 文献标识码：A 文章编号：1003-9783(1999)06-0367-03
Identification of Commercial P. Qinquefolium by DNA Fingerprints
WANG Pei-xun, HUANG Feng, ZHOU Lian, et al.
(Clinical Pharmacology Institute, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510405)
Abstract:Various P.quinquefolium species were analyzed polymorphologically by random amplified polymorphological DNA(RAPD)method. Most of random primers showed polymorphous.Fingerprints of real products of P.quinquefolium are considerably different from adulterants.Most of P.quinquefolium species have the similar fingerprints except three species from Shanxi Province.
Keywords:Panax Quinquefolium/chemistry; @ Random amplified polymorphological DNA method/utilization;TCD identification
西洋参原产于美国和加拿大，其味甘、微苦、凉，具有滋补强壮、养血生津、宁神益智、润肺清热等功能。现代医学也证明其对心血管系统疾病、神经系统疾病、免疫性疾病等具有较好的疗效，药用价值较高。市场上，西洋参从原药材到多种保健品制剂如袋泡茶、洋参丸等都有大量伪品出现。采用随机扩增多态性DNA技术［1］(RAPD，Random amplified polymorphic DNA)可对西洋参原药材及其制剂进行鉴别。
我们在进行引物筛选时，发现陕西三个产地的西洋参用某些引物进行扩增时，其指纹图与其他产区的西洋参指纹图有不同程度的差异，本文对有关问题进行了探讨。
1 材料和方法
1.1 中药材样品 (1)本实验采用的各地产西洋参(PanaxquinquefoliumL.)由广州市药品检定所谢培山教授赠送，西洋参各制剂为市售。(2)人参(生晒参)PanaxginsengC.A.Mey购自广州清平药材市场；商陆Phytolaccaacinosa Roxb.购自广州清平药材市场；沙参Adenophora本校附院提供；白芷Angilicadahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.Et Hook.f.广州市药材公司提供。以上样品由本校中药鉴定教研室鉴定。
1.2 试剂 Tris(B.M.),SDS(Serva),Marker(本文所用Marker均为MBI的100bp DNA Ladder Plus),Taq酶、引物(上海Sango)，琼脂糖(Promega)，其余试剂均为国产分析纯。
1.3 主要仪器 低温高速离心机(BeckmanGS-15R);紫外/可见光分光度计(Pharmacia4000);凝胶成像自动分析仪(UVPGDS7600G)；低温恒温式电泳仪(LKB)；PCR仪(PE2400)；纯水仪(MilliporeQ-R)。
1.4 DNA提取 称取0.2g各中药材样品用玻璃砂研磨，采用我室改进的高盐、低pH法［2］获得总DNA。
1.5 DNA扩增 反应体积为25μl。其成分为：MgC122.5μl(25mmol/L)引物2μl(5μmol/L)，BSA1μl(25g/L),4种dNT[1] [2] 下一页
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