物对小鼠白血病L1210细胞的毒性作用将浓度不同的CN提取物作用于体外培养的小鼠白血病L1210细胞72 h。结果见表1。 表1 CN不同提取物用MTT法对小鼠白血病L1210细胞的抑制作用（略）
*P＜0.05；**P＜0.01vs compared with the negative control group
从表1可以看出，醋酸乙酯部位对白血病细胞株L1210的抑制作用较弱，而石油醚部位对白血病细胞株L1210有一定的抑制作用，IC50为21.35 μg·ml-1，CN正丁醇部位、CN多糖部位对L1210细胞有很强的抑制率作用，IC50分别为6.97 μg·ml-1，5.85 μg·ml-1；阳性对照As2O3的IC50分别为13.40 μg·ml-1。
2.2 CN提取物对小鼠白血病L1210细胞集落形成的抑制作用 CN正丁醇部位及CN多糖部位不同浓度对L1210细胞集落形成，用As2O3 作阳性对照。结果见表2。
表2 CN提取物不同浓度对肿瘤细胞株集落形成的影响（略）
*P＜0.05；**P＜0.01vs compared with the negative control group；n=10
表2结果显示，CN正丁醇部位、多糖部位的3个实验剂量组对L1210细胞的集落形成均有不同程度的影响，各剂量组与阴性对照组均有显著的差异。
2.3 CN提取物对小鼠白血病L1210细胞凋亡的影响用不同浓度的CN正丁醇部位、CN多糖部位处理L1210细胞72 h，用Hoechst 33258染
色后，在荧光显微镜下可见凋亡细胞，细胞强蓝色荧光，弱红色荧光，在终浓度为15.62 μg·ml-1，CN正丁醇部位、CN多糖部位、阳性对照组对L1210细胞凋亡率分别为（46.26±3. 80）%，（52.21±5.31）%，（56.12±3. 9）%， L1210细胞自然凋亡率为（10.36±1.7）%。在15.62 μg·ml-1范围，CN正丁醇部位、CN多糖部位对L1210细胞凋亡率与阴性对照组相比较有显著性差异（P<0.01）。 3 讨论
白血病是造血系统的恶性肿瘤，占癌肿总发病率的5%左右，是儿童和青少年最常见的一种恶性肿瘤。目前白血病的治疗大多以化疗为主，其作用是全身性的，毒副作用较强，因此，寻找高效低毒、抗瘤谱广、综合性能又好的植物来源的抗癌药是现在研究的重点。
体外抗肿瘤实验为抗肿瘤药物筛选过程必不可少的部分。利用体外肿瘤细胞培养和MTT法，以抑制肿瘤细胞增殖为活性指标，是目前一种快速、经济、简便、有一定特异性的药物筛选方法，在MTT法实验基础上采用集落形成能力试验、细胞计数、蛋白质或其他大分子物质含量测定，能客观地反映被测物质的药理作用。通过此方法，不仅可以发现有效的抗肿瘤药物，而且还可以从细胞水平和分子水平对抗肿瘤机制进行研究［4，5］。
本研究中，细胞毒试验（MTT法）实验结果显示，CN不同提取物对L1210细胞都有不同程度的抑制作用，且其抑制作用呈明显的剂量关系。其中CN正丁醇部位、CN多糖部位对L1210细胞的半数致死浓度（IC50）<20 μg·ml-1，符合体外抗肿瘤疗效评价规定［6］：植物粗提物的IC50小于20 μg/ml时，则判断样品在体外对肿瘤细胞有杀伤作用。集落形成实验表明，集落形成抑制率随着CN提取物剂量的增加而增大，说明CN提取物能降低L1210细胞恶性程度，而Hoechst 33258染色法实验进一步佐证CN提取物抗L1210细胞增殖作用，并初步证明CN提取物对L1210细胞的抑制作用可能通过诱导细胞发生凋亡来实现的。
【参考文献】
［1］ 曾 靖，黄贤华，赖 飞，等.夜来香水提取液局部麻醉作用［J］.赣南医学院学报，
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