清于试管中，加0.3g活性炭，用力振摇，过滤，取滤液0.5ml加5%三氯醋酸1ml，10%硫脲1滴，2% 2，4-二硝基苯肼0.5ml(空白管最后加入)，摇匀，60℃水浴45min，冰水充分冷却及有效振摇下滴加85%硫酸3.5ml，在分光光度计(波长540nm)下测光密度值。于标准曲线上查出样品所含抗坏血酸含量，再计算100mg肾上腺中含抗坏血酸的量。
抗坏血酸含量(μg/100mg)＝样品抗坏血酸浓度×3.5/肾上腺重量×100%
4.2.3 胸腺指数测定 动物称重后，摘取胸腺组织称重，计算胸腺指数，胸腺指数(mg/g)＝胸腺重量/动物体重。
4.2.4 T细胞增殖的测定 各组动物断头处死，无菌取脾，剪碎研磨取悬液，加Tris-NH4Cl，加不完全RPIM1640培养液洗涤两次，离心(1500r/min，5min)弃上清，调细胞数至5×106。向96孔板中加入脾细胞悬液每孔200μl，再加入ConA(终浓度为5μg/ml)。37℃，5%CO2条件培养68h。每孔掺入3H-TdR 0.5μCi，振荡后，继续培养4h，用多头样品收集器将各孔的细胞吸于玻璃纤维滤纸上，用生理盐水洗滤10次，自然风干，放入加有闪烁液的闪烁瓶中，避光过夜。次日，用液体闪烁计数仪测样品的每分钟脉冲数(cpm/min)。
5 统计学方法 实验结果均以X±s表示，组间差异采用方差分析，以P＜0.05作为显著性差异的标准。
结果
1 消疲怡神口服液对冷水应激大鼠血清单胺类物质及其代谢产物含量的影响 见表1。模型组大鼠血清E、DA、HVA、5-HT及5-HIAA含量比正常组升高，其中DA含量升高尤为显著(P＜0.05)；消疲怡神口服液可以降低DA、HVA、5-HT含量，并使5-HIAA含量升高，而对E含量无明显影响。人参皂甙组血清5-HIAA含量较模型组升高，其余各项指标无明显变化。
表1 各组大鼠血清E、DA、HVA、5-HT及5-HIAA含量的变化比较 (μg/L，X±s) 组 别 n E DA HVA 5-HT 5-HIAA 正常对照 10 35.8±12.9 380±281* 70.3±33.0 140±93 42.7±17.4 模 型 9 52.6±19.8 853±456 81.0±25.4 183±133 51.7±33.2 人参皂甙 13 52.1±30.9 780±400 76.1±34.8 156±80 92.8±28.4* 小剂量 11 46.9±25.9 401±208*△ 56.9±18.5* 124±84 73.0±37.6 大剂量 13 60.7±20.1 554±297*△ 66.0±17.4 114±82 70.6±28.2注：与模型组比较，*P＜0.05；与人参皂甙组比较，△P＜0.05
2 消疲怡神口服液对冷水应激大鼠肾上腺抗坏血酸含量的影响 见表2。冷水应激大鼠肾上腺抗坏血酸含量比正常组明显下降(P＜0.05)；人参皂甙组肾上腺中抗坏血酸含量比模型组升高，两者比较，有统计学意义(P＜0.05)；大、小剂量组肾上腺中抗坏血酸含量亦升高，其中大剂量组与模型组比较有统计学意义(P＜0.05)。
表2 各组大鼠肾上腺抗坏血酸含量的变化比较 (X±s)
组 别 n 剂量(g/kg) 抗坏血酸(μg/100mg组织) 正常对照 13 439±35* 模 型 12 394±51 人参皂甙 13 0.07 442±36* 小剂量 13 3.5 442±84 大剂量 14 7 472±118*注：与模型组比较，*P＜0.05
3 消疲怡神口服液对冷水应激大鼠下丘脑垂体单胺类递质含量的影响 见表3。模型大鼠下丘脑垂体NE、DA、5-HT含量均降低，其中NE、5-HT含量与正常组比较，有显著性差异(P＜0.05)；人参皂甙组和大、小剂量组NE含量比模型组明显升高，(P＜0.05)；人参皂甙组和大、小剂量组5-HT含量高于模型组，其中人参皂甙组与小剂量组与模型组均有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)；模型组、人参皂甙组与大、小剂量组的DA含量没有明显差异。
表3 各组大鼠下丘脑垂体NE、DA、5-HT
含量的变化比较 (μg/L，X
±s) 组上一页 [1] [2] [3] [4] 下一页
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