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兔眼滤过术联合应用苏拉明后滤过道的组织病理学观察

0.05)。

    2.2  滤过道的天狼猩红染色观察及胶原定量分析

    胶原天狼猩红染色呈玫瑰红色,在普通显微镜下根据胶原的含量呈卷发、丝网状、波浪状、粗大状、集聚成块状等。TR+S组和TR+MMC组结膜下间隙,巩膜间隙新生胶原染色浅,以疏网状、带状、波浪状胶原为主(见图2)。TR组新生胶原以致密条束状、块状为主,纵横交错、排列紊乱。

    HMIAS-2000图像分析仪对天狼猩红染色后胶原的面密度和A值分析结果:三组面密度值比较,差异具有统计学意义(F=108.12,P<0.05)。进一步进行SNK比较,TR+S组和TR+MMC与TR组比较,差异均有统计学意义,而该两组间差异无统计学意义。三组A值进行方差分析,差异有统计学意义(x2=2.41,P=0.29)。见表2。

    2.3  滤过道的成纤维细胞量  滤过道病理切片苏木素—伊红染色和鼠抗人波形蛋白单克隆抗体的免疫组化染色后,光镜下观察滤过道成纤维细胞量。结果显示,三种不同术式后成纤维细胞量均不同程度增多(见图3)。分级后,应用K-W 检验法进行统计学分析发现,各组间成纤维细胞量差异有统计学意义(x2=11.98,P<0.05)。结果表明三种不同手术方式对术后滤过道成纤维细胞量均有影响(见表3)。进一步两两分析比较(Nemenyi法)后可知:

    ①TR+S组成纤维细胞量少于TR组,两组间差异有统计学意义(x2=10.62,P<0.05)。

    ②TR+MMC组成纤维细胞量少于TR组,两组间差异有统计学意义(x2=10.35,P<0.05)。

    ③TR+S组与TR+MMC组术后成纤维细胞量差异无统计学意义(x2=0.02,P>0.05)。

    2.4  滤过道的新生血管量  滤过道病理切片经第Ⅷ因子单克隆抗体免疫

组化光镜观察,结果显示,三组不同手术后的兔眼滤过道都有不同程度的新生血管(x2=13.00,见图4)。TR组的新生血管较TR+MMC和TR+S组多,差异具有统计学意义(x2=5.19); TR+S组、TR+MMC组滤过道的新生血管量差异无统计学意义(x2=11.30,P>0.05),见表4。

    3  讨论

    苏拉明是一种多磺酸萘醌盐,20世纪初期被用于临床治疗非洲锥虫病和丝虫病,20世纪80年代开始用于艾滋病的防治研究。近年来,苏拉明被发现在血管内膜增生狭窄、自身免疫性疾病及慢性阻塞性肺疾病甚至肿瘤等疾病防治中都能发挥其广泛的功能。在眼科研究领域中,Mietz等[8]和Huang等[9]应用酶联免疫吸附剂沉淀法测出,苏拉明能显著抑制人眼成纤维细胞分泌胶原的能力,在整个实验过程中对细胞的蛋白质无毒副作用。

    青光眼滤过术常见的并发症是术后数月内手术区结膜—Tenon囊—巩膜水平的成纤维细胞过度增生,胶原沉积,滤过区瘢痕化,滤过道堵塞,导致手术失败。在术后伤口的修复过程中,大量生长因子和细胞因子的释放,可以和转化生长因子、血小板源性生长因子、表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子等多种生长因子受体结合并抑制其活性[10],减少某些生长因子受体的表达,还可解离已与受体结合的生长因子[11]。因此,采用生长因子抑制剂苏拉明作用于青光眼滤过泡内的组织来研究该药物是否可作为青光眼滤过术后抗瘢痕形成的辅助用药。

    本实验证实,500 μg/ml的苏拉明作用于家兔滤过泡内组织能明显减少成纤维细胞的增殖、新生胶原纤维的增生和新生血管的形成,其作用效力与目前临床应用的丝裂霉素相当。在预实验中,我们用MTT法证实500 μg/ml的苏拉明对细胞增殖有明显的抑制作用,在24 h后即发生作用;400 μg/ml的苏拉明在48 h后发生作用;300 μg/ml的苏拉明在72 h后才有显著性差异。但是应用丝裂霉素的患者由于睫状体上皮细胞的代谢受到影响,可出现长期的低眼压,角膜内皮和上皮细胞也容易受到影响从

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