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磷酸化酶mRNA在水稻雌蕊中表达的时空动态

陈绍荣 吕应堂 杨弘远

  摘 要 利用RNA原位杂交技术, 对水稻受精前后雌蕊组织切片进行磷酸化酶基因表达的定位。结果显示, 磷酸化酶mRNA在柱头、花柱、子房壁以及维管束中大量表达, 而胚珠中除合点部位外表达很弱。受精前后的胚囊中各细胞磷酸化酶mRNA表达也很弱, 并且没有明显的时空变化。在积累淀粉的胚乳细胞中磷酸化酶mRNA大量分布。原胚中的磷酸化酶mRNA表达较弱, 到分化胚积累过渡性淀粉时才显著增加。本文首次对磷酸化酶mRNA在植物雌性器官发育过程中的时空分布动态作了初步研究。
  关键词 磷酸化酶mRNA,水稻,雌蕊,RNA原位杂交
  中图分类号 Q37

The Temporal and Spatial Changes of Phosphorylase mRNA Expression in Rice Pistils

CHEN Shao-Rong LU Ying-Tang YANG Hong-Yuan
(Laboratory of Plant Reproductive Biology,College of Life Sicience,Wuhan University,Wuhan430072)

  Abstract Phosphorylase gene expression was localized in tissue sections of rice pistils before and after fertilization byin situRNA hybridization. Phosphorylase mRNA was substantially expressed in the stigma, style, ovary wall and vascular bundle, but weakly in ovular tissues except chalazal portion. It was weakly expressed and did not show temporal and spatial changes in embryo sacs before and after fertilization. A great quantity of phosphorylase mRNA was distributed in endosperm cells accumulating starch grains. Phosphorylase mRNA was less in proembryos, but significantly increased in differentiation embryos accumulating transition starch. This report is, for the first time, a tentative investigation on the temporal and spatial expression patterns of phosphorylase mRNA in plant female organ development.
  Key words Phosphorylase mRNA,Rice,Pistil,in situ RNA hybridization

  磷酸化酶(EC2.4.1.1)能催化降解a-1,4-葡聚糖(a-1,4-Glcn)得到葡萄糖-1-磷酸(Glc-1-P), 还能催化糖蛋白的生成〔1〕。关于磷酸化酶在淀粉合成代谢中的作用一直存在争议〔2〕, 许多研究者认为所有淀粉都由糖基转移酶合成, 但也没有证据能否定磷酸化酶在淀粉合成中的作用。近年发现糖调节许多基因的表达, 而这些表达产物大都在糖代谢中起直接或间接作用。磷酸化酶基因的表达也受糖的调节, 且主要在糖含量较高的条件下刺激表 达〔3〕。虽然对磷酸化酶从基因到蛋白水平的研究比较广泛, 但植物有性生殖过程中磷酸化酶基因表达与生理功能的研究还未见报道。水稻等禾谷类植物的雌蕊发育早期为生殖器官, 以后因胚乳中积累淀粉而逐渐成为储藏器官(颖果), 是磷酸化酶基因表达研究的理想材料。我们利用RNA原位杂交技术, 以地高辛(digoxigenin, DIG)标记的反义磷酸化酶RNA为探针, 初步研究了水稻雌蕊受精前后磷酸化酶mRNA的表达特征。

1 材料与方法

1.1 材料
  水稻(Oryza sativaL.) 品种

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