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ATP对辐射损伤小鼠空肠肠腺存活率和cGMP含量的影响 |
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率为106.77～99.97cGy/min，剂量1150 cGy。照射总时间的一半后将动物翻身，以保证照射剂量的均匀。照射时除腹部外躯体的其余部位用5 cm厚的铅块屏蔽。
1.2 试剂和器材 125I-cGMP放射免疫测定试剂盒购自上海中医药大学核医学研究中心，用国产FG-2008Gγ自动免疫计数器计数。 注射ATP 0.2 ml，剂量分别为6、8及12 mg/kg，对照组注射0.2 ml生理盐水。
1.3 肠腺存活率的测定 照后第4 d和第6 d，采用颈椎脱臼法活杀小鼠，在距Treitz韧带远端3～4 cm处，取约3 cm长的空肠段，用生理盐水冲净肠内容物，固定标本，显微镜下计数一定面积肠片上的肠腺和绒毛数，按下式计算肠腺存活率。
1.4 125I-cGMP放射免疫测定 取新鲜空肠50 mg，放入盛有2 ml预冷的50 mmol/L、pH 4.75的醋酸缓冲液中匀浆，离心后把上清置60℃水浴蒸干。用国产FG-2008Gγ自动免疫计数器测定放射性，按100 mg湿重组织计算其含量。
1.5 数据处理 用第四军医大学统计教研室SPLM软件方差分析。
2 结果
2.1 照后4天cGMP含量下降，肠腺存活率下降见表1。
表1 照后4 d cGMP含量和肠腺存活率的变化
（n=5，±s)
组 别 肠腺存活率(%) cGMP含量
正常对照组 100.0±4.87* 7.14±1.12*
照射对照组 34.2±2.13 2.75±0.83
* P<0.05
2.2 ATP可明显提高照射小鼠空肠肠腺存活率 随着ATP注射量的改变，照射小鼠空肠肠腺存活率也改变（P<0.05）。ATP注射量大于6 mg/kg，随着剂量的增加，肠腺存活率下降，所以最适剂量为6 mg/kg，见图1。
图1 ATP剂量与空肠肠腺存活率关系 (n=5， ±s)
2.3 ATP可明显提高小鼠空肠cGMP含量 随着ATP注射量的改变，照射小鼠空肠cGMP含量呈同步改变（P<0.05)。ATP注射量大于6 mg/kg，随着药物剂量的增加，空肠cGMP含量下降，所以在此剂量范围内，其最适剂量为6 mg/kg，见图2。
3 讨论
在正常情况下，ATP在DNA、RNA和蛋白质合成中起到重要作用，是治疗中使用的能量合剂中的重要组成部分。在我们以前的实验中，核酸及其前体对辐射引起的肠道损伤具有修复能力，受照射前后使用ATP可提高肠腺存活率［1,2］。如何防治机体受射线的损伤，是一个有待解决的问题。人们选用生物制剂和细胞因子，但到目前为止无一理想的抗放药物。ATP是一种临床常用，价格便宜的药物对肠道损伤修复作用机理值得进一步研究。
图2 ATP剂量与cGMP含量关系 (n=5， ±s)
照射后4天cGMP含量下降，肠腺存活率下降（P<0.05)，见表1 。照后使用ATP明显提高受腹部照射小鼠空肠肠腺存活率和cGMP含量（P<0.05)。ATP注射量不同，照射鼠空肠肠腺存活率和cGMP含量也不同。ATP注射量大于6 mg/kg时，随着药物剂量的增加肠腺存活率和cGMP含量下降。所以最适剂量为6 mg/kg。照后4d，ATP明显提高了受辐射损伤小鼠空肠cGMP含量，促进肠道的恢复。
辐射早期电离粒子直接引起机体损伤或诱导机体产生自由基损伤，一般认为一氧化氮自由基引起cGMP生成速度加快［3,4］。正常机体cGMP与cAMP相拮抗，cAMP抑制DNA的合成［5］。机体受照射后DNA合成降低，分解增强，机体成消耗体质。cGMP升高抑制了cAMP的含量，从而降低其抑制DNA合成作用。肌肉注射ATP升高了肠道cGMP，可提高DNA合成，促进肠道损伤的修复。
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