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大鼠细动脉平滑肌细胞内酸中毒对ATP敏感钾通道的影响 |
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刘杰 赵克森 金春华
摘 要 目的：研究细胞内酸中毒对细动脉平滑肌细胞膜KATP通道的影响。方法：应用膜片钳技术的内面向外式记录酶性分离的细动脉平滑肌上KATP通道。结果：当细胞内无ATP时，细胞内酸中毒降低通道电导，通道平均开放时间(Tom)和开放时间长成分有所增大，对通道开放概率无明显影响；当细胞内有ATP时，细胞内酸中毒使通道电导增大，通道开放概率增加。结论：平滑肌细胞内酸中毒减弱ATP对KATP通道的抑制作用，并能在ATP存在条件下激活KATP通道，是酸中毒降低血管平滑肌反应性的重要机制之一。
主题词 酸中毒；小动脉；肌，平滑；大鼠
Effect of intracellular acidosis on ATP-sensitive K+ channels
in arteriolar smooth muscle cells
LIU Jie, ZHAO Ke-Sen, JIN Chun-Hua
Department of Pathophysiology, The First Military Medical University, Guangzhou (510515)
Abstract AIM:To study the effect of intracellular acidosis on KATP channels.METHODS：The currents of KATP channels were recorded on inside-out patches of enzymatically isolated arteriolar smooth muscle cells.RESULTS：In the absence of ATP, a decrease of intracellular pH (pHi) significantly reduced the single channel conductance. The mean open time and time constant for open time were slightly increased. In the presence of ATP, a decrease of pHi significantly increased the single channel conductance and the open probability. CONCLUSIONS：Intracellular acidosis markedly reduced the inhibitory effect of ATP on KATP channels in excised patches from arteriolar smooth muscle and activated these channels in the presence of ATP. The activation of KATP channels might be one of the mechanisms for acidosis decreasing vascular reactivity.
MeSH Acidosis; Arterioles; Muscle, smooth;Rats
自从ATP敏感钾通道(KATP)在心肌发现以来，又先后在胰岛β-细胞，骨骼肌，平滑肌和神经元发现该通道的存在。不同组织，通道活性的调节机制不同，各自所起的生理作用不同。在血管平滑肌细胞，KATP通道对膜电位和血管张力的调节起重要作用［1］。KATP通道对细胞内ATP十分敏感，细胞内ATP抑制通道活性［2］。此外，它还受代谢因素调节。已发现细胞内酸中毒改变心肌、骨骼肌、胰岛β-细胞KATP通道活性［3～5］，继而影响它们的收缩和分泌功能。血管平滑肌细胞内酸中毒发生于许多疾病和病理过程，我室曾发现，重症休克后期，细动脉平滑肌细胞内发生严重酸中毒，减弱血管的舒缩功能。但细胞内酸中毒减弱平滑肌舒缩功能的机制尚不清楚，至今未见其对KATP通道作用的报道。因此，本实验将应用膜片钳技术，探讨血管平滑肌细胞内酸中毒对KATP通道的影响，从细胞、分子水平阐明细胞内酸中毒减弱血管反应性的机制。
材料与方法
(一)细动脉平滑肌细胞分离：采用我室建立的细动脉平滑肌分离方法［6］。健康成年SD大鼠，雌雄不拘，体重180～220 g。断头处死后，打开腹腔，用含0.1%胰蛋白酶[1] [2] 下一页
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