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抑制性底物杂交 SSH 技术研究BXSB小鼠的差异表达基因

李 莹 韩文玲 杨高云 宋朱声 张颖妹 狄春辉 邓鸿业 马大龙

  中国图书分类号 R392.11
  摘 要 目的:利用抑制性底物杂交技术(Suppression subtractive hybridization,SSH),以BXSB狼疮小鼠为模型,研究系统性红斑狼疮(SLE)发病相关基因。方法:分离BXSB和C57-BL-6小鼠骨髓细胞,提取mRNA,反转录构建cDNA文库,利用SSH技术研究BXSB小鼠差异表达基因。结果:获得了12个阳性克隆,其中有3个克隆编码TCR、MHC Ⅱ类分子及逆转录病毒基因表达产物,均在BXSB狼疮小鼠高表达,表明其与系统性红斑狼疮发病有关;1个在BXSB狼疮小鼠高表达的基因可能为新的cDNA片段,已被GenBank收录,登记号码为AF093453。结论:TCR、MHC Ⅱ类分子及逆转录病毒基因表达产物与系统性红斑狼疮发病有关。
  关键词 系统性红斑狼疮 抑制性底物杂交 BXSB小鼠

Isolation of the differentially expressed genes in the BXSB mouse model of systemic lupus erythematosus by SSH(Suppression subtractive hybridization)technique

LI Ying,HAN Wen-Ling,YANG Gao-Yun et al
Department of Immunology,Beijing Medical University,Beijing 100083

  Abstract Objective:To isolate the differentially expressed genes in BXSB mouse.Methods:Separated bone marrow cells from the BXSB and C57-BL-6 mice,extracted the polyA+RNA,synthesized the dscDNA by reverse transcription,and identified the differentially expressed genes by SSH technique.Results:Twelve positive genes were isolated,three of them have been reported to be related to SLE,including TCR,MHC Ⅱ and retrovirus gene products.In addition, found one novel gene similar to the TCR gene,submitted it to GenBank,and accepted an accession number AF093453.Conclusion:TCR,MHC Ⅱ molecule and retrovirus gene products may play important role in the development of SLE.At the same time,other molecules may also be related to SLE.
  Key words Systemic lupus erythematosus Suppression subtractive hybridization BXSB mouse

  系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一种侵犯多系统、多器官的自身免疫病。它的发病与遗传、病毒感染、环境等多种因素有关,遗传因素起更重要的作用,但目前对其发病相关基因的研究还比较少。小鼠SLE模型的出现,大大促进了对其发病机理的研究。BXSB小鼠是狼疮小鼠的一种,雄鼠发病早,与人类SLE有相似的免疫学异常和病理表现[1]。过继转移实验表明,BXSB小鼠发病的细胞学基础在于骨髓或脾脏中的造血干细胞,与细胞发育的微环境和体内的激素水平没有关系[2]。细胞转移及Y染色体转移实验表明:BXSB雄鼠Y染色体上的突变基因Yaa基因(Y chromosome-linked autoimmune accelerator)能够加速自身免疫病的发生。但Yaa基因本身并不能使遗传背景正常的小鼠发病,必须依赖于有自身免疫病发病倾向的小鼠体基因发生异常,即系

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