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甘草甜素对大鼠血压的影响及其机制 |
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treated with glycyrrhizin were significantly increased. The level of aldosterone was decreased but that of corticosterone was increased in perfusate treated with glycyrrhizin. RT-PCR showed that glycyrrhizin inhibited the expression of 11β-HSD2and CYP11B2 mRNA in aorta. Conclusion These results confirm that glycyrrhizin is able to induce hypertension. There is evidence that it inhibits the enzymes of both 11β-HSD2 and CYP11B2 in vasculature and leads to higher corticosterone and lower aldosterone production in vesseles as well as an increase in vascular responses to norepinephrine.
【Key words】 Hypertension Hydroxysteroid dehydrogenases Glycyrrhizin
目前，临床及实验资料均证实11β-羟化固醇脱氢酶2型（11β-hydroxysteroid dehydrogenase type2）缺陷可导致血压升高［1，2］。甘草诱导高血压的研究正受到国际有关人士的高度重视，其机制是通过抑制11β羟化固醇脱氢酶2型产生与其先天性缺陷相同的临床表现［3］。现报告如下。
材料和方法
一、甘草甜素对大鼠血压的影响
1.实验动物（随机分组）：（1）Wistar大鼠对照组：7只，雄性。体重250～350 g；（2）Wistar大鼠甘草甜素（Sigma, USA）5周组，9只，雄性，体重250～350 g；（3）Wistar大鼠甘草甜素3个月组，6只，雄性，体重250～350 g，由第一军医大学动物中心提供。喂普通饮食。
2.实验步骤：实验前观察大鼠日饮水量，配给甘草甜素200mg.kg-1.d-1，每日更换1次，每周末称重，调整下周给药剂量，共给药5周及3个月。对照组给饮用水。实验结束时，应用戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔麻醉，切开腹壁，暴露腹腔，腹主动脉插管，连接Slrecust 961仪（西门子公司），待血压稳定后，测腹主动脉血压。
二、心脏及主动脉滋养动脉的组织学观察
于第5周及3个月末处死大鼠，取出心脏和主动脉，大体检查后固定于福尔马林生理盐水中。次日，自心脏中部横断切取厚约2 mm组织一块；在靠心尖端组织中取左心室前壁约2 mm×2 mm，主动脉自主动脉弓起始部取5 mm。固定后的组织以石蜡包成硬块，切成厚5 μm的组织切片，经苏木精和伊红（HE）染色，光镜检查。
三、肠系膜血管对去甲肾上腺素加压反应
采用McGregor修饰法行肠系膜离体灌注，灌注液为Krebs-Ringer液［4］，温度37℃并与 95% O2+5% CO2混合气体饱和，流速4 ml/min，连接八道生理记录仪持续监测灌注压。待灌注压稳定后，分次给予0.5 μg，2.0 μg去甲肾上腺素，观察灌注压的变化。
四、肠系膜血管网离体灌注液中皮质醇及醛固酮的检测
对Wistar大鼠肠系膜血管网离体灌注1.5小时，弃去前半小时液体，留置后1小时240 ml液体，用Sep-Pak C18柱（Waters公司）提取，提取液在冷冻干燥机中冻干，用甲醇溶解至20 μl用于高效液相，反向高效液相仪（日本岛津），ODS柱，SPD-10AV紫外检测仪280处监测，流动相为40%甲醇，60%水，流速0.7 ml/min，真正醛固酮及corticosterone（相当于人的皮质醇）的保留时间分别是13及19分钟，上样标本取第13及19分钟各0.7 ml，冻干，蒸馏水10 μl溶解用于放免检测（北方免疫试剂研究所），标本孵化时间24小时。
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