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参麦注射液对骨关节炎模型动物关节液中白细胞介素

切开膝关节囊,取关节液不少于200 μl,-20 ℃冰箱冻存,留待检测其中IL-1含量;同时切取股骨髁软骨,留作病理检查,Ⅲ组作相同处理。固定后6周3组家兔再作同上处理,Ⅰ、Ⅱ组余下家兔去除石膏,自由活动到9周末,3组所剩家兔全部处死,处死后处理方法同3、6周。
1.6 检测方法:采用ELISA双抗体夹心法标记所收集关节液中的IL-1,使呈有色反应,酶标仪450 nm处读取A值,通过绘制标准曲线,计算出关节液中IL-1含量。切取的股骨髁软骨处理后光镜、电镜观察,以证实OA模型复制成功。
1.7 统计学处理:各组数据采用±s表示,组间差异采用两样本均数的双侧t检验进行判断。P>0.05为差异无显著性,P<0.05为显著差异,P<0.01为差异极显著。

2 结果

2.1 IL-1检测结果(见表1):可以看出,Ⅱ组家兔关节液中IL-1水平始终比同批次另外两组的高,差异极显著(P<0.001);Ⅰ组与Ⅲ组比较,仅6周时有显著差异(P<0.05),3周和9周时差异不显著(P>0.05)。

表1 关节液中IL-1水平检测结果(±s)   pg/ml


分组 分批(周数)
3 6 9
参麦组 11.12±0.64 12.00±0.80 11.15±0.32
盐水组 14.02±0.83 17.29±0.53 16.52±0.51
正常对照组 10.15±0.16 10.07±0.24 10.28±0.37

2.2 IL-1变化趋势(见图1):3周时Ⅱ组家兔关节液中IL-1水平已明显升高,6周达高峰,9周略有回落,但幅度很小,Ⅰ组3周时IL-1水平稍高于正常,6周时上升至峰值,但仍显著低于Ⅱ组,9周时明显回落,接近正常。


图1 3组家兔关节液中IL-1变化

3 讨论

3.1 参麦注射液用于OA治疗的理论推测:参麦注射液是根据明代《症因脉治》所记载“参冬饮”古方,经现代科技加工而成,其主要成分是红参和麦冬。以往参麦注射液多用于心血管疾病的治疗,但随着对其药理作用的不断阐明,参麦注射液在临床的应用范围也逐渐扩大[4,5]。鉴于OA病变发生发展过程中参与因素的复杂多样,并根据对参麦注射液的现有研究成果,我们认为参麦注射液可能从以下几个方面发挥对OA的治疗作用:①清除自由基:自由基在OA病变过程中扮演了重要角色,孙材江等[6]的实验证实,OA患者红细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性明显下降,血浆脂质过氧化物(LPO)含量显著升高,二者呈负相关,表明OA患者体内氧自由基代谢发生了紊乱。Bukhardt等[7]发现氧自由基可抑制关节软骨细胞DNA合成,破坏软骨细胞膜结构。而参麦注射液的主要成分人参和麦冬则具有清除氧自由基和降低血浆过氧化脂质的作用。人参皂甙对肾缺血再灌注损伤产生的氧自由基具有清除作用,并能保护内源性超氧化物歧化酶(SOD)活性,减轻肾脏脂质过氧化损伤[8]。在杨灿荣[9]的实验中,发现参麦注射液能够阻止钙离子向细胞内的流动,抑制氧自由基的生成。经过参麦注射液治疗后,肺心病患者中脂质过氧化物浓度明显下降,而抗氧自由基的酶类浓度明显上升。此外麦冬还能够加速损伤心肌细胞DNA复制、稳定细胞膜结构,有利于损伤的修复。②免疫调节:OA病变的进展常伴有免疫反应的参与。Cooke[10]在OA软骨表面发现有免疫球蛋白IgG、IgM和补体C3沉着,并且沉着部位软骨病变较重。而参麦注射液对机体的细胞免疫和体液免疫均有明显的双向调节作用[11],在阎芳等[12]的实验中,参麦注射液能够改善免疫反应对心肌的损伤。由此推测参麦注射液可能对关节软骨局部过强的免疫反应进行调节,控制OA进展。③降低骨内高压:研究发现,OA患者的软骨下骨内压显著升高[13],这是OA患者关节痛的重要原因。骨内高压的产生与软骨下骨髓腔内静脉血液淤滞关系密切,参麦注射液具有活血化瘀、通气畅血之功效。现代药理研究表明参麦注射液能够扩张血管,改善微循环,增加回心血量,降低循环阻力[14],对血液淤滞具有较好疗效,阳晓等[15]的实验表明参麦注射液可以使腹膜小动脉的扩张率从20%增加到45%,小静脉从15%增加到32%。估计参麦注射液的这种作用一方面可以改善OA软骨下骨髓腔内的血流状态,另一方面又可以使由于静脉淤滞产生的过多代谢产物如

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