|
CD137在SLE患者外周血淋巴细胞的表达 |
| |
赵文璞 曹英林 张利宁 李兴福 孙汶生 马春红
4-1BB是由Kwon等〔1〕于1989年在小鼠CD4＋、CD8＋T细胞中发现的一种膜表面分子，它在T淋巴细胞活化过程中发挥着协同刺激作用〔1〕。1996年Lotz等〔2〕分离出经淋巴细胞活化诱导的膜分子称为ILA(induced by lymphocyte activation)并确认ILA是存在于人细胞表面的小鼠4-1BB的相似物。在1996年日本神户会议上将ILA及人4-1BB(Hu4-1BB)命名为CD137〔3〕。由于CD137富含半胱氨酸，所以成为肿瘤坏死因子受体超家族的新成员。CD137主要表达于经PHA、PMA、CD3单抗活化的T淋巴细胞表面，经PMA、抗细胞膜表面Ig抗体活化的B淋巴细胞表面，还表达于一些非淋巴细胞如经IL-1β活化的血管内皮细胞及肝癌细胞表面，但不表达于静止的细胞表面〔4〕。SLE患者体内存在着自身活化的淋巴细胞，故笔者有兴趣对SLE患者外周血淋巴细胞CD137的表达研究，以深入探讨其在SLE发病机制中的作用。
1 资料与方法
1.1 研究对象
SLE诊断符合1982年ARA的SLE分类修订标准。根据临床症状及实验室检查结果分为活动期和缓解期。活动期符合下列条件：①临床症状明显：不规则发热、新出皮疹、口腔溃疡、浆膜炎、关节肿痛或神经系统病变。②补体C3降低、IgG升高、抗双链DNA(ds-DNA)抗体阳性。研究对象为SLE活动期患者16例，正常对照组8人。
1.2 材料
Ficoll分离液(购自中国医学科学院血液病研究所)，PHA(Sigma公司)，CD137单抗(Famingen公司)，FACS(Becton Can)
1.3 方法
1.3.1 用Ficoll分离液常规分离正常人及SLE患者外周血单个核细胞。
1.3.2 淋巴细胞转化试验：将分离的单个核细胞用RPMI 1640培养液(含10% FCS、100 IU/L青霉素、100 g/L链霉素)稀释成1×109/L，取100 μl细胞悬液置96孔板中，每个样本设4个组：①未加PHA对照组；②PHA刺激24小时组；③PHA刺激48小时组；④PHA刺激72小时组。在第①组中加入50 μl培养液，②③④组中加入50 μl PHA(终浓度为100 mg/L)在37 ℃、5% CO2中培养。
1.3.3 FACS测定CD137的表达：分别将培养板中的细胞吸出放入试管中，细胞总数为5×105，加10 μl 1∶10稀释的CD137单抗(0.5 g/L)，室温30分钟，PBS洗3次，加100 μl 1∶50稀释的FITC-羊抗鼠Ig，室温30分钟，PBS洗3次，上FACS(Becton Can)待测。
2 结果
2.1 SLE患者与正常人外周血淋巴细胞表面CD137表达的差异。细胞流式仪检测结果见第189页表1。正常人外周血淋巴细胞不表达CD137，而SLE患者外周血淋巴细胞相对于正常人有CD137的表达，其表达率约8%。
表1 CD137在正常人与SLE患者外周血淋巴细胞未经PHA刺激及刺激后的表达率
时间
d
表达率(%)
P值
正常人(n＝8) SLE(n＝16)
0(未刺激) 0.64±0.05 7.76±0.4 ＜0.05
1 8.16±1.28 16.22±0.8 ＜0.05
2 12.39±2.15 28.90±1.4 ＜0.05
3 21.61±4.30 35.64±1.78 ＜0.05
2.2 SLE患者与正常人外周血淋巴细胞经PHA刺激后CD137表达率的差异。正常人外周血淋巴细胞经PHA刺激后表达CD137，PHA刺激24小时表达率约为8%，48小时表达率约为12%，72小时表达率约为21%。SLE患者外周血淋巴细胞经PHA刺激24小时表达率约为16%，48小时表达率约为29%，72小时表达率约为36%，均显著增高。
3 讨论
CD137作为肿瘤坏死因子受体超家族的新成员，其生物学功能还不完全清楚，但它参与淋巴细胞的增殖与凋亡己毋庸置疑。①CD137与淋巴细胞增殖。CD137配体或[1] [2] 下一页
上一个医学论文： 某些风湿性疾病合并军团菌感染状况的研究
下一个医学论文： 老年性类风湿关节炎强的松治疗与骨密度的研究
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 内科论文 >> 正文