人类呼吸道合胞病毒粘附 G 蛋白的研究进展

　　2 抗原结构

　　目前，对HRSV G蛋白白免疫研究最多的方面是抗体反应分析，尚未发现存在对人G蛋白的I类抗原限制性细胞毒T淋巴细胞反应。

　　2.1 鼠单克隆抗体反应。现在已有大量抗HRSV g蛋白鼠单克隆抗体用于HRSV 分离株的A、B亚型分类。通过检测单抗与大量毒株的反应，在G蛋白上鉴别出三种抗原决定簇：（1）在所有分离株上均存在的保守表位；（2）相同抗原亚型毒株拥有的亚型特异性抗原决定簇；（3）相同抗原亚型的某些毒株存在株（个体）特异性或变异性抗原决定簇，位于G分子C-端1/3处[12]。

　　用所有抗G单抗与G分子进行Western印迹分析或合成肽反应，发现单抗仅识别线性而非构象性表位（Nonformational epitops）[13]。碳水化合物也有助于抗原的构成，并且某些抗体也不与非糖基化G蛋白前体反应，或抗体依靠细胞型特异性糖基化识别G分子[14]。有趣的是抗体识别依赖碳水化合物现象仅见于G蛋白的高丝氨酸/苏氨酸含量区的某些变异性表位，而并非位于胞外区中间段的保守性和亚型特异性表位，以及缺逐潜在糖基化的位点[14]。

　　用单抗挑选逃避变异株进行序列分获得了HRSV g蛋白一级结构的表位图谱。识别保守的和A型特异性表位的抗体选择氨基酸改变位于G分子中心区的逃避变异株[12]；识别株-特异性表位的抗体，除外抗体021/5G，选择氨基酸改变位于半胱氨酸群之前的变异区的变异株，均选择氨基酸改变
位于G分子C-端变异区的逃避变异株[12，15，16]。因此，抗原决定簇的保守或变异性决定了相应的抗体所选择的G蛋白一级结构的氨基酸改变位点。某些抗体选择在G蛋白序列中氨基酸残基紧密排列处发生氨基酸替换的变异株，再次重申抗体识别线性表位。没有抗体能够在G蛋白一级结构的远端挑选变异，表明该处缺乏构象性表位。

　　除单个氨基酸替换外，一些逃避变异株还发生了更显著的突变：（1）用63G挑选的毒株，单个腺苷酸（A）缺失或插入引起了读框移位突变一极端情况下，读框移位突变改变了G蛋白C-端1/3处全部序列[15]；（2）不成熟的中止密码，使G蛋白长度变短[12，16]；（3）多重A-G转换（A-G超变异,hypermutations）引起所编码的氨基酸改变[12]。以上说明：G蛋白，特别是与抗原性相关的C-端1/3部分可容纳多重序列改变。已有研究发现：G基因编码C-端1/3部分之间的一小部分区域易发生聚合酶错误，尤其是参与mRNA正义链腺苷连续的增加或缺失，被感染的细胞mRNA可编码C-端改变了的G蛋白。

　　2.2　人恢复期血清反应。通过检测恢复期血清与合成肽或由细菌表达的G分子反应，形成了自然感染后产生的人抗体所识别的G蛋白一级结构的抗原决定簇图谱[17，18]。早期分析表明：取自HRSV原型株A2的肽链仅识别G蛋白的中央保守区肽链。Cane等用人恢复期血清识别出G分子和C-端1/3处的四条肽链，并发现自然分离株的氨基酸改变取消了血清对肽链的识别[18]。用包括G蛋白C-端1/3处第84-85位氨基酸残基的融

　　总之，G蛋白C-端1/3处含鼠单缺和人恢复期血清识别的多重抗原决定簇。单个氨基酸替换或读框移位突变和未熟的中止密码等更显著的突变均可导致抗原决定簇的改变。某些变异株G分子关健的抗原决定簇位点发生改变，HRSV似乎准备好了克服此变异株感染后产生的抗体所造成的免疫压力。

　　3 G蛋白的进化类型

　　Coates等用超免疫血清进行中和实验，首次在抗原水平证实了HRSV分离株的变异。后来用各种抗将HRSV分离株分成A、B两个抗原亚型，也与病毒的遗传性差异有关。有关HRSV变异性的进一步研究主要集中在G蛋白的原因如下：（1）两种抗原亚型的毒株间G蛋白的抗原性和遗传性差异最大[7]；（2）G蛋白是中和性和保护性抗体反应的目标之一。

　　多数HRSV分离株，主要是A亚型的序列分析揭示出G蛋白的广泛变异性[10，11，19]。HRSV进化的特点如下：（1）Cane和Carcia等人的研究证实A亚型毒

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