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用免疫荧光方法检测鼻咽分泌物中多种呼吸道病毒抗原

申昆玲 买颍 刘亚谊 江载芳 照日格图 Annika Linde

  【摘要】 目的 评价一种商品化的免疫荧光检测试剂 (Chemicon International Inc, Temecula, CA, USA)用于呼吸道病毒感染诊断的敏感性及特异性。方法 间接免疫荧光方法,包括筛查及确定试验。筛查试剂中含有7种混合单克隆抗体,即甲型及乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒(RSV)、副流感病毒1、2、3型及腺病毒单克隆抗体。此外还有分别针对上述7种病毒的单克隆抗体用于确定试验。本研究用Chemicon 试剂盒对96例患儿的冻存鼻咽分泌物或支气管肺泡灌洗液细胞涂片标本进行回顾性检测,并与病毒分离结果进行比较。此外还用Chemicon 试剂检测了1994年11月~1995年2月北京儿童医院300例下呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物标本。结果 与病毒分离结果相比,Chemicon确定试剂检测病毒抗原的敏感性为95%、特异性为86%。北京儿童医院的标本中有38%(105/280)被确定为病毒感染,其中甲型流感病毒20%、RSV 14%、腺病毒3%、副流感病毒1、2、及3型7%。结论Chemicon呼吸道病毒诊断试剂能够同时检测多种呼吸道病毒抗原,对于确定呼吸道病毒感染是一种非常好的方法。但需要注意的是在筛查试验中有4%~8% 的标本呈非特异染色。
  【关键词】 荧光免疫测定  呼吸道合胞病毒  抗体,单克隆  抗原,病毒

Detection of multiple respiratory viral antigens in nasopharyngeal secretions with immunofluorescence assay SHEN Kunling*, MAI Ying, LIU Yayi, et al.* Department of Pediatric Internal Medicine, Beijing Children′s Hospital, Beijing 100045
  【Abstract】 Objective Antigen detection with immunofluorescence is an efficient method for diagnosis of respiratory tract infections, but such a method previously has not been applied for simple screening of multiple respiratory viruses. Pools of monoclonal antibodies against various respiratory viruses are now available, and are proven to be potentially important tools for improvement of antigen detection in nasopharyngeal secretion specimen. To evaluate the commercially available Chemicon immunofluorescence assay (IFA, respiratory viruses panel and identification kit), an indirect IFA containing a pool of monoclonal antibodies for screening for influenza virus types A and B, respiratory syncytial virus (RSV), parainfluenza virus types 1,2 and 3 and adenovirus, and the respective individual monoclonal ntibodies.Methods Frozen nasopharyngeal secretions or bronchoalveolar lavage specimens from 96 patients with respiratory infections were retrospectively examined with the assay, and the results were compared with cell culture virus isolation. Nasopharyngeal secretions from 3

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