导向溶栓研究的某些进展

　　1.5 t-PA或u-PA突变体：Yamada等通过在 t-PA分子中引入Arg-Gly-Asp(RGD)序列构建了几种突变体 t-PA。实验表明，这种突变体具有以RGK依赖的方式对血小板整合素（如α2Ⅱβ2）高度亲和的特性。同时仍保留了t-PA一样的纤溶活性，提示这种双功能分子可用作血小板血栓的特异性溶栓剂。董晨等[10]将人工合成的编码GPRP四肽的寡核苷酸序列连接至scu-PA(144-411)克隆脱氨核糖核酸（cDNA）的5 端，并将其重组克隆到表达载体PKK233-2中，在大肠杆菌中得到5%的表达量。体外实验表明，这种突变体纤溶效率为LUK的2-3倍，对纤维蛋白的亲和性比LUK提高了6倍，且对纤维蛋白原亲和力很强，提示GPRP四肽可提高尿激酶对纤维蛋白的专一性。

　　构建具有趋血栓特异性的靶向溶栓剂是实验导向溶栓的一个主要途径，然而尽管应用基因工程技术构建了很多这类新型靶向溶栓剂，但其溶栓效力及血栓特异性作用仍达不到理想的程度，因而仍处在实验研究阶段，未能应用于临床。

　　2 脂质体靶向携载溶栓剂

　　脂质体是一种由磷脂双分子层组成的囊泡，由于其免疫原性低，体内易代谢，无毒副作用，因而可作为一种理想的药物载体。晚近，很多研究表明[11，12]，应用脂质体包裹t-PA或链激酶（SK），可大大降低出血等并发症，同时促进了SK被递送到血栓及其附近的浓度。应用的动物血栓模型观察表明，脂质体包裹SK恢复血管再通的时间只游离SK的50%。凌世长等[13]应用RGDS多肽修饰的脂质体包裹尿激酶（UK），利用RGDS与活化血小板表面的纤维蛋白原受体的特异性亲和作用，引导脂质体溶栓剂的靶向性溶栓效应。

　　脂质体靶向携载溶栓剂为实现导向溶栓提供了一种新的方法，但由于仍然存在很多问题未得到解决，如脂质体进入血液循环后，易被网状内皮系统清除，在血栓部位不易达到有效浓度；另外，如何控制脂质体在血栓部位释放溶栓剂，仍未能解决，因而限制了该技术的进一步应用。

　　3 导管导向溶栓：

　　对于有些血栓性
疾病，如肺栓塞，静脉给药常难凑效。应用局部导管直接在血栓部位给药，可大大减低药物剂量，减轻副反应，同时达到快速、完全溶栓之目的[14，15]。如Beitzke等通过局部导管给药治疗一例左肺动脉栓塞的3岁患儿，取得成功，血栓完全溶解，未出现任何副反应。对于急性心肌梗塞（AMI）患者应用溶栓治疗可使血管再通，降低死亡率。但大样本调查表明仍有20%-35%的病例溶栓失败。而且还有10%-15%的病人出现再梗塞。近年来，主张对AMI应用经皮冠状动脉腔内成形术（PTCA）直接治疗。Grines等[16]对比了PTCA溶栓治疗的效果，二者可获同样的治疗效果；使用t-PA治疗的病人2%发生颅内出血，而PTCA组无事件发生。

　　应用局部导管直接给药或是经PTCA直接消除血栓是治疗血栓的最佳途径，但需要较高的技术设备条件，而且对患者有一定创伤，不易普及开展。

　　4 基因定位转移

　　随着分子生物学理论与技术的日益发展，应用基因治疗某些疾病成为可能。Dichek等[17]在体外应用重组t-PA逆转录病毒载体，转染动脉和静脉的内皮细胞，并在stent和Graft膜上培养，培养后的内皮细胞再植入动脉内，其血中t-PA的浓度可升高10-30倍，并持续2-3个月，可以有效防止实验性血栓形成与血管再狭

参考文献

Agelli G,Pascucci C,Nenci G,et al.Thrombolymic and haemorrhagic effects of bolus dosed of t-PA and a hybrid plasminogen activator with prologed plasma half life.Thromb Haemast,1993,70:294

Novokhatny V,Medved L,Lijnen R,et al.Tissue-type plasminogen activator (t-PA)interacts tieh urokinase-type plasmigen activator (u-PA) via t-PA s lysine binding site.J Biol Chem,19

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