μl·min-1, 注射完毕后留针5 min。骨孔用骨蜡封闭。
1.2.2 肿瘤鉴定 所建立荷瘤鼠7只，于接种后第7、11、15天行俯卧横断位、冠状位、矢状位T1WI、T2WI及增强扫描。扫描参数：T1WI采用SE序列；T2WI采用FSE系列；增强造影剂为钆双胺注射液（Amersham Health 公司），剂量为1.2 ml·kg-1,经尾静脉注射。病理切片：标本经10％甲醛固定，石蜡切片，HE染色。免疫组织化学检查：大鼠经颈总动脉相继以生理盐水及4％多聚甲醛PBS溶液（pH 7.35）灌注固定后取脑，制成石蜡切片，脱蜡水化后与GFAP作免疫组织化学检查，用ABC法染色。流式细胞学检查：取第11天荷瘤鼠，处死后取米粒大小的瘤组织，经剪碎、胰酶消化、过滤、漂洗后用70％乙醇固定，行流式细胞DNA细胞周期分析。
1.2.3 肿瘤对血脑屏障的影响 5只荷瘤鼠及2只正常鼠经尾静脉注入5ALA。4 h后，荷瘤鼠分别取瘤组织、肿瘤周边脑组织及对应的左侧脑叶组织，正常大鼠取右侧相应部位脑组织。组织块约3 mm 大小，经洗净血液后，剪碎、消化、过滤打匀制成细胞悬液，行荧光分光光度计分析。激发波长为402 nm。
1.2.4 颅骨开骨窗，肿瘤切除对荷瘤鼠的影响 取29只近皮层胶质瘤模型，其中开骨窗加肿瘤切除组13只，于接种第11天以接种针道为中心开5 mm×5 mm大小骨窗，暴露瘤组织并在头带式显微镜下切除；开骨窗组大鼠9只，于接种第11天同上法开骨窗，但不切除肿瘤；其余7只荷瘤鼠不予开骨窗，设为对照组。3只开骨窗加取瘤组术后行头颅MRI复查后处死，取脑行病理检查了解肿瘤残余情况。其余所有大鼠观察生存状态和生存期。
1.3 统计学处理
用SPSS 10.0分析，大鼠生存期记作x-±s,行单向方差分析。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 模型建立
本实验共接种近皮层C6胶质瘤模型鼠54只。所有大鼠死亡后均取脑，52只接种部位有肿瘤生长，成功率96.3%。2只大鼠脑叶未见有肿瘤生长，但对应在蛛网膜下腔可见有不规则块状瘤组织，考虑与细胞悬液沿针道流入蛛网膜下腔有关。所有接种成功模型中肝、肺、胰、脾、肾未见肿瘤生长。
2.2 MRI
头颅增强扫描示右侧脑叶近皮层高信号占位。第7天荷瘤大鼠占位大小约2 mm×3 mm,厚度约1.5 mm，肿瘤尚未生长到脑表面。11 d荷瘤鼠占位灶可达3 mm×4 mm,厚度约3 mm，灶周出现水肿，中线轻度左偏,见图1。15 d荷瘤鼠占位灶可达4 mm×5 mm，中间厚度可达4 mm，中心可见低信号坏死灶，灶周水肿、中线偏移明显。1只大鼠在接种后出现一皮下转移灶，经MRI及病理证实为C6胶质细胞瘤,见图1。
上一页 [1] [2]
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 临床医学论文 >> 正文