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CD44在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义 |
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李力 姚德生 赵仁峰 张洁清 唐步坚 陈心秋 何靖育 古明华
为探讨CD44在卵巢肿瘤组织中的表达及其临床意义。我们采用RNA逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法，对卵巢肿瘤及对照组织中的CD44标准型（CD44S）变异型（CD44V）以及变异型中的一些亚型（CD44V3、V6、V9）的表达进行检测。现报道如下。
一、材料与方法
1.标本来源及临床资料： 全部标本均取自广西医科大学肿瘤医院妇科及广西壮族自治区人民医院妇科，1996年3月至1997年5月住院的肿瘤患者的手术切除组织，并经病理学检查确诊，分为：（1）卵巢恶性肿瘤41例（粘液性癌10例、浆液性癌11例、内膜样癌2例、低分化腺癌10例、内胚窦瘤3例、无性细胞瘤2例及颗粒细胞瘤、未成熟畸胎瘤、睾丸母细胞瘤各1例）。全部恶性肿瘤均接受肿瘤减灭手术，并按FIGO（1988年）标准行术后病理分期。33例上皮性和8例非上皮性恶性肿瘤患者，均在术后分别接受顺铂加环磷酰胺加阿霉素和顺铂加平阳霉素加长春新碱的化学治疗，疗程3～10个，平均5.2个。全部患者均随访至1997年12月，最短6个月最长20个月。近期疗效评价按WHO的4级评定标准［1］。（2）卵巢良性肿瘤20例（粘液性瘤6例、浆液性瘤8例、良性畸胎瘤6例）。（3）正常卵巢组织21例。
2.CD44表达的检测方法： 采用RT-PCR法，其中组织总RNA提取采用酸性异硫氰酸胍一步法［2］。 cDNA合成采用美国Promega公司提供的逆转录cDNA合成试剂盒。PCR寡核苷酸引物参照文献［3］设计，并由中国科学院上海生物工程研究中心合成。PCR扩增反应采用三阶温控法，其中CD44S/V为94℃变性60秒，64℃复性60秒，72℃延伸90秒，30个循环；CD44V3为94℃变性60秒，62℃复性60秒，72℃延伸60秒，30个循环；CD44V6、V9为相对94℃变性60秒，62℃复性30秒，72℃延伸30秒，30个循环。PCR产物采用非变异性聚丙稀酰胺凝胶电泳和硝酸银染色显像，方法参照文献［3］。电泳结果分析，以DNA相对分子质量参照物对比碱基对大小，以出现明显与目的基因碱基相同的区带为阳性［4］。
二、结果
1.各类组织中CD44的表达： （1）各类组织中的CD44S阳性表达率相比较，差异无显著性（P>0.05）；（2）恶性肿瘤组织中的CD44V、V3、V6、V9阳性表达率均高于正常组织，恶性肿瘤与正常组织比较，差异有显著性（P<0.05）；同时CD44V、V3、V9的阳性表达率也明显高于良性肿瘤（P<0.05）。见表1。
表1 恶、良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织中CD44的表达
类别 总例数 CD44S(+) CD44V(+) CD44V3(+) CD44V6(+) CD44V9(+)
例数 百分率(%) 例数 百分率(%) 例数 百分率(%) 例数 百分率(%) 例数 百分率(%)
恶性卵巢肿瘤 41 41 100.0
32
78.0
19
46.3
34
82.9 20
48.8
良性卵巢肿瘤 20 20 100.0 8 40.0 4 20.0 17 85.0 4 20.0
正常卵巢组织 21 20 95.2 1 4.8 1 4.8 3 14.3 0 0.0
2.恶性肿瘤组织中CD44阳性表达与病理类型和组织学分级的关系：CD44V、V3、V6和V9在不同病理类型和组织学分级的组织中阳性表达率相比较，差异均无显著性（P>0.05）。
3.恶性肿瘤组织中CD44阳性表达与临床期别的关系：16例I～II期患者肿瘤组织中CD44V 、V3、V6和V9阳性表达分别为68.8%、25.0%、62.5%和43.8%，明显低于25例Ⅲ～Ⅳ期患者的84.0%、60.0%、96.0%和52.0%；两者比较，差异有显著性（P<0.01～0.05）。
4.恶性肿瘤组织原发灶、癌旁和转移灶中CD44阳性表达情况：CD44V3、V9在转移灶中的阳性表达率明显高于原发灶和癌旁组织。两者比较，差异有显著性(P<0.05）。
5.恶性肿瘤组织中CD44表达与其近期疗效的关系：CD44V3在完全缓解和部分缓解的患者组织中的阳性表达率明显低于无缓解和病变发展者，两者比较，差异有显著[1] [2] 下一页
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