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高效液相色谱法测定复方狼毒注射液中苦参碱的含量 |
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宋茹 袁继民 于连生
摘要：采用HPLC法，以Shim-pack CLC-ODS为色谱柱，乙腈-0.02 mol.L-1磷酸二氢钠(60∶40)为流动相，检测波长210 nm，测定复方狼毒注射液中苦参碱的含量。结果：苦参碱在0.15～0.90 mg.ml-1范围内呈线性关系，γ=0.999 3，平均回收率为99.13%，RSD=0.99%。方法简便快速，结果准确可靠，可作为该制剂的质量控制方法。
关键词： HPLC法； 复方狼毒注射液； 苦参碱
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1008-0805(2000)09-0789-01
Determination of Matrine in Compound Radix Euphorbiae fischerianae Injection by HPLC
SONG Ru，YUAN Ji-min，YU Lian-sheng
(Institute for Drug Control of Jinan Military Region, Jinan 250022)
Abstract: HPLC method is used for the determination of matrine in Compound radix euphorbiae fischerianae injection with the column of Shim-pack CLC-ODS, the mobile phase of acetonitrile-0.02 mol.L-1 sodium phosphate monobasic (60∶40), detection wavelength of 210 nm. Results: The linear range is 0.15～0.90 mg.ml-1,γ=0.999 3, the average recovery is 99.13% and RSD=0.99%. The method is simple, rapid and accurate, it can be a quality control standard of Compound Radix Euphorbiae fischerianae injection.
Key words: HPLC; Compound Radix Euphorbiae fischerianae injection; Matrine
复方狼毒注射液由苦参、狼毒等中药组方制剂而成，具有清热燥湿、解毒活血之功效，临床上用于治疗牛皮癣、疥疮等皮肤病，疗效确切，毒副作用小。方中苦参为君药，用量较大。为确保制剂质量，应控制其活性成分苦参碱的含量。目前，对苦参类制剂中苦参碱的含量测定，多采用薄层扫描法［1］，也有文献报道用高效液相色谱法［2］、高效毛细管电泳法［3］、气相色谱法［4］等。我们在开发研究复方狼毒注射液的同时，建立了苦参碱的HPLC含量测定方法，该法简便，且灵敏度高，可用以控制其内在质量。
1 仪器与试药
1.1 仪器：岛津LC-6 A高效液相色谱仪；岛津SPD-6 AV紫外检测器；岛津C-R 4 A数据处理机。
1.2 药品与试剂：苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所)；复方狼毒注射液(自制)；乙腈为色谱纯；其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件：色谱柱Shim-pack CLC-ODS (6.0 mm×150 mm)；流动相为乙腈-0.02 mol.L-1磷酸二氢钠(60∶40)；检测波长210 nm；流速1.0 ml*min-1；柱温35℃。本条件下样品的色谱图见图1。
图1 苦参碱高效液相色谱图
A 苦参碱对照品 B 复方狼毒注射液 C 阴性对照品 1 苦参碱
2.2 标准曲线制备：精密称取适量的苦参碱对照品，加流动相溶解并制成1.5 mg*ml-1的溶液，精密量取1，2，3，4，5，6 ml，分别置10 ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。取10 μl进样，按上述色谱条件测定，以峰面积对浓度(mg*ml-1)进行回归，得回归方程为：Y=781 185 X-467 421，γ=0.999 3。可知苦参碱在0.15～0.90 mg*ml-1范围内呈良好的线性关系。
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