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布洛芬对创伤小鼠细胞免疫功能的影响 |
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创伤(如手术创伤、意外创伤和烧伤等)后机体免疫功能会出现下降趋势，表现为感染机会增多，脓毒症的发生率增高。创伤致使免疫功能低下的原因也很多，如应激、感染、出血［1］等。本课题拟从前列腺素角度，观察分析创伤后免疫功能改变的机制，并寻求改善创伤后免疫功能的方法。
资料和方法
一、动物：Balb／c小鼠，雄性，6～8周龄，20～25g，购于中科院上海实验动物中心。
二、创伤模型和实验分组：小鼠乙醚麻醉后，一侧后肢股动脉结扎，于膝关节处行截肢术。然后分①对照组(n＝7)：不行任何手术；②生理盐水组(n＝28)：行截肢术后腹腔注射生理盐水0.5ml；③布洛芬组(n＝28)在截肢术后给予腹腔内注射布洛芬(1mg/kg)。后两组分别取7只于截肢术后1天、3天、5天、7天颈椎脱位处死，取脾脏分离淋巴细胞测细胞免疫功能，对照组则于当天做上述处理。
三、细胞免疫功能测定：采用淋巴细胞转化试验(ConA刺激)和NK细胞杀伤活性测定(Eu3＋释放法)，分别测定小鼠的细胞免疫功能。前者用刺激指数表示(刺激指数＝刺激值/本底)，后者用NK细胞杀伤活性表示：NK细胞杀伤活性(%)＝(实验性释放－自然释放)/(最大释放-自然释放)
四、计量资料采用均数±标准差(±s)，用团体t检验，P＜0.05为有显著性差异。
结果
一、布洛芬对创伤后小鼠脾脏淋巴细胞转化功能的影响
生理盐水组小鼠淋巴细胞的增殖功能受到明显抑制，直至创伤后第7天(P＜0.05)，Ibu组小鼠淋巴细胞增殖能力也下降，但恢复较生理盐水组快，创伤后第7天即与对照组无显著差异，且淋巴细胞增殖的受抑程度也较生理盐水组轻(创伤后第1、3天P＜0.01，第5天P＜0.05)，见图1。
图1 布洛芬对创伤后小鼠淋巴细胞转化功能的影响
与对照组比较，*P＜0.05 **P＜0.01
与创伤组比较，＃P＜0.05 ＃＃P＜0.01
二、布洛芬对创伤后小鼠脾脏NK细胞杀伤活性的影响
两组小鼠的NK细胞功能显著受抑(P＜0.01)，但Ibu组小鼠的NK细胞功能较生理盐水组明显提高(创伤后第1天P＜0.01，第3天P＜0.05)，见图2。
图2 布洛芬对创伤后NK细胞功能的影响
与对照组比较， *P＜0.05 **P＜0.01
与创伤组比较， ＃P＜0.05 ＃＃P＜0.01
讨论
前列腺素是一种较强的免疫抑制剂，体外实验显示生理剂量的前列腺素即会引起淋巴细胞增殖能力等细胞免疫功能的下降［2］。创伤引起机体免疫功能改变与单核/巨噬细胞密切相关［3］，创伤刺激可以改变单核细胞各亚群之间的比例，使得分泌PGE2的单核细胞亚群数量和功能明显增强，分泌大量前列腺素，特别是PGE2，严重的创伤还能诱导抑制性T细胞(Ts细胞)的活性，Ts细胞又可以促进单核细胞的PGE2的分泌［4］。单核细胞分泌的大量前列腺素还可以抑制IFNγ，从而抑制IL-1的合成［5］，Ts细胞活性增高又可以使T-辅助细胞(TH细胞)的功能受到抑制，使TH细胞的IL-2分泌明显减少，淋巴细胞的增殖功能也随着下降。此外，IFNγ量的下降，反馈性抑制巨噬细胞分泌前列腺素的功能被抑制，使前列腺素的分泌更多。所以，前列腺素在细胞免疫功能中起着比较重要的作用。
本研究结果显示创伤后使用布洛芬的小鼠细胞免疫功能虽然较正常状态所有下降，但与单纯创伤相比，其淋巴细胞增殖能力和NK细胞杀伤活性都有显著提高，说明前列腺素是创伤后引起细胞免疫功能下降的一个重要因素。本结果还显示用布洛芬组小鼠的免疫功能与对照组小鼠比较也有下降，可能与布洛芬的用量有关，本实验观察术后只用了一天的布洛芬，可能对于其后再分泌的前列腺素的抑制效应相对有限，需进一步深入研究；另外前列腺素不是引起创伤后免疫功能抑制的唯一因素，还与创伤应激引起肾上腺皮质激素、儿茶酚胺的大量分泌以及脑内IL-1分泌有关。所以，要更好的保护创伤后机体的免疫功能，还得从多途径进行综合治疗。
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