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直流电场促进脊髓再生的实验研究 |
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n addition, all indexes in group B were better than that in group D. Conclusion The direct current electric field can effectively promote spinal cord regeneration. But, the therapeutic effectiveness was much better when the stimulator was implanted earlier after the injury.
【Key words】 Electric stimulation Spinal cord Guided tissue regeneration
自80年代后期，国外开展了直流电场促进哺乳类动物脊髓再生的实验研究，并证实直流电场能促进脊髓再生[1－8]，国内报道很少。但国外对直流电场促进脊髓再生的研究多集中在大鼠、豚鼠或猫，直流电场能否促进犬脊髓再生？不同电场电压对脊髓再生是否有别？脊髓损伤后立即置入电刺激器与损伤后数小时再置入电刺激器对脊髓再生是否有影响？电刺激器是否被机体排斥等国外均未见报道，需进一步深入研究。为此，对上述问题我们开展了深入的研究，为过渡到临床应用提供依据。
材料与方法
一、动物与分组
选用中国健康杂种家犬32只，体重10～12kg，犬龄1.5～2岁，随机分成4组，每组8只犬。A组为对照组，B组12V电刺激组，C组6V电刺激组，D组为脊髓损伤后6小时置入12V电刺激组。每组于伤后1个月取2只犬脊髓标本，伤后2、3个月各取3只犬脊髓标本做组织学检查。
二、电刺激器的制作
电刺激器由小型高容量电池（12V、6V）、电阻（3.6kΩ）、纯银丝(直径0.5mm)、医用人体硅胶管(内径0.8mm)等构成。按文献报道的方法[1－3]并略加改进，银丝及电阻上均套硅胶管，一根银丝接在电池的阴极，另一根接在电阻的一端，电阻的另一端接在电池的阳极，两电极相距8mm，用牙科树脂包埋，电极的终端为2mm×2mm的盘状电极板(图1)。此电刺激器直径1.4cm，长3.6cm，重8.5g，释放28μA及14μA电流。置入前用福尔马林薰蒸消毒。对照组刺激器内不放电池，电流为0μA。
图1 电刺激器
三、脊髓损伤及电刺激器置入
静注戊巴比妥钠麻醉(25mg/kg)，沿棘突后方正中切口，切除T13～L1全椎板，除去硬膜外脂肪，显露该处脊髓背侧,用AllenWD法,545gef致伤能量致脊髓完全性损伤[9,10]。在T11、T12右侧椎板及棘突间钝性剥离骶棘肌，将电刺激器置入该处骶棘肌下方。用显微外科技术将电刺激器阳性电极板置入T12椎板下硬膜囊之腹侧，阴性盘状电极置入L2椎板下硬膜囊背侧，A、B、C三组为脊髓损伤后立刻置入电刺激器，D组为脊髓损伤后6小时再置入电刺激器。
四、观察指标
(1)神经功能检测，采用功能级别10分法进行评定[9]。(2)皮层体感诱发电位(CSEP)测定，采用DANTEC公司产Cantata(TM)体感诱发电位仪，分别于脊髓损伤后及伤后1、2、3个月进行测定，主要观察P1潜伏期和P1－N1波幅变化。(3)组织学检查，取各组伤后1、2、3个月损伤处脊髓，分别做HE、尼氏体染色、脊髓灰质神经元计数。(4)神经元图像分析，用IBAS－2.0图像分析仪测量神经元截面积及尼氏体密度。
所有数据以表示，进行t检验统计学处理。
结果
一、神经功能检测
伤后1个月，B组能行走，D组可站起，但随意倒下，伤后2个月，B组接近正常，D组已能行走，C组界于B、D组之间，A组恢复最差，1个月为0分，3个月仅为3分（表1）。
表1 各组神经功能检测
n 1个月 n 2个月 n 3个月
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