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慢性低氧大鼠肾上腺皮质球状带的变化

瓦龙美 Cervos-Navarro Jorge*
(华北煤炭医学院组织学与胚胎学教研室 唐山 063000;*德国柏林自由大学神经病理研究所)

  摘 要 将Wistar大鼠喂养在逐渐降低的常压低氧条件下,用氮气和空气的混合气体
调节氧含量。氧浓度由正常含量逐步降低为15%、12%、10%、8%,最后降至7%,实
验共进行112d。结果显示低氧动物体重下降,肾上腺重量减少,肾上腺皮质球状带萎
缩,脂质丢失,球状带细胞线粒体肿胀和空泡变性,溶酶体增多。表明在慢性常压低
氧中,当吸入气氧含量降至7%时,可导致肾上腺皮质球状带细胞超微结构改变,从而
影响醛固酮的合成与分泌。
  关键词 低氧 球状带 超微结构 萎缩 大鼠

  低氧指氧对组织的供求比例失调,氧供量减少,不足以维持组织的代谢、功能和结
构的需要[1,2]。由于供氧不足和氧利用障碍,均可引起机体缺氧。人和动物的慢性低氧
血症,可见于低压性低氧,如高原性疾病,但更多的是因血液和循环功能障碍引起的常
压低氧,如贫血、慢性心、脑、肺血管疾病等。大鼠是研究慢性低氧作用的较好的实验
动物[3],本研究用Wistar大鼠制作慢性常压低氧动物模型,探讨吸入气氧含量降至7%时
(此值为机体失去代偿的临界值[4]),肾上腺皮质球状带的变化,为临床慢性低氧性疾病
的内分泌改变提供一定的形态学依据。

材料和方法

1.实验材料
  取24只雄性Wistar大鼠,16只用于低氧组,8只用于对照组,实验开始时体重为180
~220g,由德国柏林自由大学动物实验中心提供。光镜和电镜制样用试剂戊二醛、多聚
甲醛、四氧化锇、磷钨酸、醋酸铀和Araldite502均由Sigma公司供给。
2.低氧模型
  大鼠喂养在有机玻璃制作的低氧仓内,仓体容积为0.36m3,每个低氧仓内放置2个
鼠笼,每个鼠笼内喂养2只大鼠。温度和相对湿度稳定,仓内按预定值泵入空气和氮气
的混合气体,形成常压低氧环境。仓内气体每小时全部更新5次。混合气的比例用二氧
化碳仪和测氧仪监控,二氧化碳浓度不超过0.5%。大鼠先在仓内正常氧含量喂养1周,
然后逐步降低氧浓度,低氧级别与时间见表1。每3d开放1次鼠笼,清扫,补充食物和
水,此时大鼠被暴露于常氧条件下数分钟,同时测量大鼠体重。实验共进行112d。对
照组动物呼吸空气,其他条件与低氧组相同。
  大鼠经7%低氧浓度喂养4周后处死。取右侧肾上腺石蜡包埋切片,HE染色,光镜
观察。取左侧肾上腺经2%戊二醛和2%多聚甲醛4℃固定,过夜,1%四氧化锇后固定
18h,丙酮梯度脱水,1%磷钨酸和0.5%醋酸铀染色1h,Araldite502包埋,用钻石刀和超
薄切片机(Reichert Ultracut,O¨esterreich)切片厚为75nm的超薄切片,自动铅染色仪(LKB
Bromma 2168 Ultrastainer Carlsberg System,Leica)20℃染色11min,透射电镜(Zeiss EM-10,
Germany)观察并摄片。

结 果

1.体重与肾上腺重量变化
  经112d低氧处理后,低氧组大鼠体重和肾上腺重量均减少,与对照组比较,低氧
组大鼠体重和肾上腺重量分别下降23.7%和17.5%(表2)。
2.光镜观察
  2.1 对照组:肾上腺皮质表面的被膜由8~10层结缔组织细胞组成,球状带均匀分
布于被膜下,与束状带间界限较清楚。细胞呈团索状排列,核圆形或卵圆形,胞质弱
嗜酸性,其内可见细小颗粒与较多的脂滴(图1)。
  2.2 低氧组:球状带变窄,球状带细胞变小,细胞核染色较深,胞质减少,强嗜酸
性(图2)。
3.电镜观察
  3.1 对照组:球状带细胞核呈圆形或卵圆形,核内染色质分布均匀,核仁清楚,胞
质丰富,含有大量脂滴(图3)。细胞内含有丰富的线粒体,多为圆形或卵圆形,线粒体内
大多含有小管状嵴,亦可见到少数泡状嵴,基质比较丰富。溶酶体少见,核周可见高尔
基复合

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