|
卵巢癌标志物CA125酶联免疫吸附分析法的建立 |
| |
黄文林 王 雯 王晓静 崔素珍 马京民 王玉肖
摘 要 目的：建立一种血清CA125的临床检测方法。方法：一株CA125单抗用于固相包被，另一株与辣根过氧化物酶偶联制备CA125的酶标记物，以四甲基联苯胺(TMB)为底物，采用一步法，建立了CA125的酶联免疫吸附分析法(ELISA)。结果：灵敏度为2.00 U/ml。批内CV值低于5.32% (n=22)，批间CV值低于7.39% (n=26)。测得回收率均值为100.9%，60例正常人血清的均值为9.20 U/ml，应用本法与IRMA方法同时测定33例病人血样，两者相关方程为Y=0.825X-10.39,相关系数r=0.960 0。结论： 该方法具有简便、快速和准确的特点，未见“HOOK”效应的影响，适于临床检测和科研应用。
关键词 CA125 酶联免疫分析法 卵巢癌
中国图书分类号 R446.61
Measurement of CA125 in serum by an enzyme-linked immunosorbent assay
HUANG Wen-Lin , WANG Wen, WANG Xiao-Jing et al.
Department of Isotope, China Institute of Atomic Energy,Beijing102413
Abstract Objective:To develop a clinical method to measure ovarian cancer marker CA125 in serum. Methods：The one-step assay is based on enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). One monoclonal antibody is employed for coating, another for labeling with horseradish peroxidase. Results：The minimum detectable dose is 2.00 U/ml and analytical recovery of CA125 is 91.1% to 107.4%. The between-runs CVs and the within-runs CVs of 3 samples are lower than 7.39% and 5.32% respectively. The average concentration of CA125 in sera from 60 healthy women is 9.20 U/ml. The correlation of results with CA125 IRMA is 0.960 0. Conclusion：The assay is a rapid, sensitive and precise method and simple to perform. It is suitable for clinical and research application.
Key words CA125 ELISA Ovarian cancer
卵巢癌是恶性度极高的妇科癌症。大多数卵巢癌均发现于晚期，其生存率较低。卵巢癌在早期被检测出来能大大降低死亡率，延长患者的生存时间，所以早期的诊断意义重大［1］。卵巢癌早期诊断的一种有效的方法是测定能灵敏反映卵巢癌病变的肿瘤相关抗原。CA125是与上皮型卵巢癌相伴随的表面抗原，它用于诊断卵巢癌的灵敏度为100%，疾病复发检测的灵敏度为81%［2］。CA125的酶联免疫分析的建立对卵巢癌早期诊断及卵巢癌患者的临床监测有着十分重要的意义。
1 材料与方法
1.1 主要试剂和仪器 辣根过氧化物酶、四甲基联苯胺、尿素过氧化物、Tween-20系Sigma公司的产品,酶标板为Nunc公司(丹麦)产品,CA125抗原、包被用和标记用CA125单克隆抗体(与AFP、CEA、PAP、PSA、CA199及CA153无交叉反应)均购于美国WHPM公司, CA125的IRMA商品药盒为日本Centocor公司生产,酶标仪及洗板机为奥地利SLT公司的产品。
1.2 实验方法
1.2.1 酶标记物的制备 采用高碘酸钠氧化法制备CA125的酶标记物［3］, 经0.01 mol[1] [2] 下一页
上一个医学论文： 应用液相放大酶免分析检测特异性IgE的方法学研究
下一个医学论文： 抗子宫内膜抗体和子宫内膜异位症
|
|
|
|
|
|
|
您现在的位置： 绿色健康网 >> 医学论文 >> 基础医学论文 >> 正文