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福建省宁化县斑点热群立克次体的研究 |
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方面全面系统地证实了存在斑点热群立克次体自然疫源地[9~13]。现将结果综合报道如下:
1 材料与方法
1.1 人群血清 采自宁化县东、西、南、北、中长期居住和劳动在林区的18个乡村从事伐木、育林、割脂、烧炭、摘菇及砍柴等人群,静脉血两批共952份,无菌分离血清,冷冻待检。 1.2 动物血清 鼠血清用电捕鼠器、鼠夹、鼠笼在林区调查点捕捉各种鼠类,编号、登记、鉴定鼠种,消毒后无菌取心血带回实验室分离血清,冷冻待检;野兔、野猪、麂、狐狸血清:分别取调查点猎人诱捕或击毙的上述野生动物心血;狗、牛血清:分别取自屠宰场,分离血清后冷冻待检。 1.3 蜱类 分别从鼠类、野兔、野猪、麂、狐狸、狗、牛动物体表及野外林间灌木草丛中捕获各种蜱类,送福建省卫生防疫站、军事医科院五所鉴定分类。 1.4 试剂与材料 西伯利亚、康氏、小蛛立克次体抗原及阳性兔血清由中国预科院流研所立克次体室提供;冻干补体、溶血素及绵羊红细胞分别由该所布病室和动物室提供;免疫荧光IgG抗体、羊抗兔IgG荧光抗体均购自北京生物制品研究所94-11批,工作稀释度1∶10;受精鸡蛋购自北京昌平种鸡场,在流研所立克次体室孵育7日后,观察鸡胚发育正常用于接种;小白鼠由流研所动物室提供(动物合格证:京字890G03号,感染动物室合格证:医动字01-2017号);PCR实验用引物根据立氏立克次体rOmpA蛋白基因设计,即Rr190.70p-602n(5-AGTGCAGCAATTCGCTCCCCCT-3和5-ATGGCGAATATTTCTCCAAAA-3),引物由中科院微生物研究所合成。 1.5 SFGR分离 应用鸡胚卵黄囊培养法,直接从野兔、麂体表捕捉的蜱,并作鉴定,分离参照文献[12~13]进行。 1.6 SFGR分离株的鉴定 分别采用mCF、IFA及分子生物学技术PCR/RFLP,按文献[13~14]对分离株进行鉴定。 以上分离、检测、鉴定均在中国预防医科院流研所立克次室和军事医科院五所进行。
2 结果
2.1 人群血清 先后检测人群血清952份, 阳性121份, 阳性率12.7%,其中西伯利亚立克次体抗体阳性率为8.9%(85/952),康氏立克次体抗体阳性率为2.5%(24/952),小蛛立克次体抗体阳性率为1.3%(12/952)。 2.2 宿主动物血清检测结果 共检测各种鼠血清125份,SFGR抗体阳性14例,阳性率11.2% 。其中西伯利亚立克次体抗体阳性率3.2%(4/125),康氏立克次体抗体阳性率6.4%(8/125),小蛛立克次体抗体阳性率1.6%(2/125),见表1。检测野兔、野猪、麂、狐狸、狗、牛等宿主动物血清188份,其阳性率见表1。 动物检测不仅显示普遍存在西伯利亚立克次体感染, 且在部分鼠类、野兔、野猪、狐狸中还存在康氏和小蛛立克次体的混合感染,这在国内亦属首次报道。但它们的血清抗体效价均不高,属中远期感染。
表1 宁化县宿主动物感染SFGR 抗体情况
动物 检测数 SFGR抗体阳性数 阳性率 (%) R.sib R.con R.aka 鼠类 125 4 8 2 11.2
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