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实验性隐睾诱导小鼠生精细胞凋亡的研究 |
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徐健 许增禄 姜英涛 钱晓菁 黄玉苓
【摘要】 目的 研究手术隐睾所致成年小鼠生殖细胞凋亡及相关调节因子bcl-2、bax蛋白在曲细精管中的定位、变化。 方法 以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling method,TUNEL)检测凋亡的生殖细胞，生物素-抗生物素蛋白DCS(biotin-avidin D cell sorter)体系间接免疫荧光法检测Bcl-2、Bax蛋白在曲细精管中的定位、分布。 结果 隐睾术后3d，手术侧睾丸重量及细胞凋亡数量与对侧无明显区别。而6～15d，睾丸重量明显减轻，凋亡细胞明显增多，以精母细胞、精子细胞为主。在正常小鼠曲细精管中，bcl-2大量表达，呈散在的颗粒状存在于各级生精细胞中，以精子细胞胞质为主。Bax蛋白表达量较少，一部分也以散在的颗粒存在于各级生精细胞质中，另一部分则较致密地分布于曲细精管基底部。隐睾术后3d，Bcl-2、Bax的表达与对侧无明显区别；6～15d，Bcl-2明显下降，Bax明显增加。 结论 隐睾明显诱导生殖细胞凋亡，Bcl-2、Bax蛋白对生殖细胞的凋亡有重要调节作用，提示温度、Bcl-2、Bax蛋白在精子发生过程中对生精细胞的主动退化可能有重要作用。
【关键词】 生精细胞凋亡 Bcl-2蛋白 Bax蛋白
CRYPTORCHIDISM INDUCES TESTICULAR GERM CELL APOPTOSIS
IN MICE TESTES AND CHANGES OF Bcl-2,
Bax PROTEIN EXPRESSION
Xu Jian, Xu Zenglu△, Jiang Yingtao, Qian Xiaojing, Huang Yuling
(Institute of Basic Medical Sciences, CAMS and PUMC, Beijing)
【Abstract】 Objective To investigate the effect of experimentally induced cryptorchidism on apoptosis in testes of adult mice and the distribution changes of Bcl-2, Bax protein. Methods Total DNA was isolated from testes and was electrophoretically separated in 1.5% agarose gel, TUNEL method, biotin-avidin DCS system indirect immunofluorescence techniques were used. Results DNA fragmentation, increasing apoptotic germ cells, in coordination with the loss of testicular weight, were observed on 6-15d in the cryptorchid testes. By TUNEL staining it was noted that postive cells were most frequently among primary spermatocytes and round spermatids. Bcl-2, Bax protein mainly distributed in cytoplasm of germ cells. With the increase of apoptosis, Bcl-2 was down and Bax was up regulated. Conclusion Temperature, Bcl-2, and Bax protein play an important role in male germ cell apoptosis.
【Key words】 Apoptotic germ cells; Bcl-2 protein; Bax protein
正常的生精过程中，存在着生殖细胞的主动退化现象，长期以来受到研究者的重视，其机制仍不清楚。近几年来，国外一些研究者开[1] [2] 下一页
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