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大鼠脊髓后角浅层初级传入C纤维内 阿片受体的免疫组织化学定位光镜与电镜研究 |
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rkedly decreased as compared with that of the control rat.Under electron microscope,it was observed that in the superficial layers of the spinal cord,MOR was distributed in some axonal terminals including the terminals of C fibers containing I-B4 binding sites as well as in the dendrites.In both the dendrites and the axonal terminals,MORs were mainly localized in the non-synaptic membranes except for the minority associated with pre-and/or post-synaptic membranes.Conclusion A considerable amount of MOR in the spinal dorsal horn originates from the primary afferent C fibers and morphine or endogenous morphine-like substances such as endomorphin may act not only on postsynaptic MOR in the dendrites but also on presynaptic MOR in the axonal terminal of C fiber to inhibit the input of C fiber,and in these processes,the nonsynaptic action of MOR agonists is likely essential.
【Key words】 Opioid receptor; Capsaicin; Griffonia simpliciflia isolectin; C fiber; Primary afferent; Spinal dorsal horn; Immunoelectron microscope
阿片物质可在脊髓后角产生明显的镇痛效应，这一作用既与对脊髓后角第二级痛觉神经元的突触后抑制有关［1］，也可能涉及到对传递痛觉的初级传入神经元的突触前抑制［2］。一些功能实验表明，阿片物质能抑制初级传入神经元释放P物质［3］，但由于实验技术的限制，目前尚无令人信服的形态学资料能证明阿片物质以突触前抑制方式抑制传入痛觉的初级传入C纤维释放P物质等痛觉递质或调质的结构基础。阿片物质通过相应的受体实现其生理作用。在哺乳动物神经系统，包括脊髓后角，至少存在μ、δ和κ 3种阿片受体［4］，其中μ阿片受体(MOR)在脊髓后角介导吗啡及内源性阿片物质的镇痛作用中尤其重要［5］。有资料表明，初级传入神经元可表达MOR［4，6，7］，脊髓后角内的一些轴突终末也呈MOR免疫反应阳性［5］，但这些轴突终末是否属于初级传入纤维及初级传入神经中与痛觉传入有关的C纤维是否也含有MOR还不能肯定。因此，本实验根据辣椒素对初级传入C纤维的特异性神经毒性［8］和西非单叶豆(griffonia simplicifolia)同工凝集素I-B4(I-B4)与C纤维选择性结合的特性［9］，应用免疫组织化学光镜、电镜技术，观察大鼠脊髓后角浅层内MOR免疫反应性与C纤维间的关系。
材料和方法
雄性Wistar大鼠14只，体重200～250g。其中10只用于辣椒素毁损实验，另4只用于电镜实验。在辣椒素毁损实验中，将10只大鼠随机分成5对，以腹腔注射苯巴比妥钠(40 mg/kg体重)麻醉后按Yaksh和Rudy［10］的方法行蛛网膜下腔瘘管埋植术，瘘管从小脑延髓池处插入，下端达脊髓腰膨大上缘(插入约7 cm)。每对大鼠中，1只经瘘管缓慢注入0.25%辣椒素(溶于含50%二甲基亚砜的消毒等渗液［11］——溶媒中)25μl(辣椒素注射组)，另1只注射溶媒25μl作为对照组。手术后动物存活3d或7d。3d或7d后，大鼠在深麻醉(按100 mg/kg体重腹腔注射苯巴比妥钠)下，用含4%多聚甲醛和1%苦味酸的0.1 mol/L磷酸缓冲液(PB，pH7.3)灌注固定，取L2～4段脊髓，用上述固定液上一页 [1] [2] [3] 下一页
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