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加强抗中性粒细胞胞浆抗体检测方法的规范化及合理应用 |
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条件的单位再做进一步的检测。
抗原特异性ELISA是较为理想的方法，特别是PR3-ELISA和MPO-ELISA，在西方发达国家已普遍使用。抗原特异性ELISA多用高纯度的抗原直接包被ELISA板。但检测抗PR3自身抗体也可以应用夹心法ELISA，该方法以抗PR3单克隆抗体包被到ELISA板上并用其捕捉PR3分子作为抗原，有人认为夹心法ELISA较直接包被的抗原特异性ELISA更敏感，因为PR3的抗原决定簇是立体构型，PR3直接结合到ELISA板上会丧失部分抗原决定簇［7］。
三、ANCA的应用及方法的选择
90年代以来，诸多ANCA特异性抗原被发现，除PR3和MPO外，还有杀菌/膜通透性增高蛋白(BPI)、弹力蛋白、组蛋白酶G、乳铁蛋白、防御素和天青杀素等。不同的抗原抗体系统往往与不同的临床疾病相关。例如，抗PR3自身抗体与WG密切相关，抗MPO自身抗体则多见于MPA和FSNGN，而抗BPI自身抗体可见于肺部炎症性疾病等［8］。因此，仅有IIF阳性来诊断原发性小血管炎是不够的，还应检测抗原特异性ELISA以协助不同临床疾病的诊断和了解疾病的发病机制。此外，ANCA监测对于指导治疗、预测复发均有重要作用。
对于怀疑原发性小血管炎的患者，应首先应用IIF法和(或)总抗原ELISA法进行筛选，阳性者则应进一步用ELISA法检测抗PR3和抗MPO等自身抗体，如IIF法检测ANCA为阳性，而PR3-ELISA和MPO-ELISA均为阴性，则应用ELISA方法检测其他已知的ANCA特异性抗原。研究结果显示单独使用IIF法对原发性小血管炎的诊断特异性为76%，如IIF法加抗原特异性ELISA则可使诊断的特异性提高至98%。
作者单位：100034 北京医科大学第一医院肾内科
参考文献
1 Gross WL, Csernok E, Helmchem U. Antineutrophil cytoplasmic autoantibodies, autoantigens, and systemic vasculitis. APMIS, 1995,103：81-97.
2 Wiik A. Delineation of a standard procedure for indirect immunofluorescence detection of ANCA. APMIS Suppl, 1989, 6：12-13.
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