实验动物传递证实密码子129甲硫氨酸纯合子Heidenhain型CreutzfeldtJakob病

　　1929年Heidenhain首先发现以迅速进展的视力改变为主的变性疾病。1954年将此症归结为Creutzfeldt-Jakob病(CJD)并称之为CJD Heidenhain变异型［1］。该型CJD的病理、临床、影像学所见，基因表达以及病程经过等， 均有若干特殊性。鉴于此型CJD国内尚无人报道以及极易误诊为枕叶梗死的事实,现将我们发现1例视力改变迅速的老年病人,经脑组织活检、 免疫组化检查、多次脑生物电描记、实验鼠传递以及朊蛋白(PrP)基因表达检测等证实为Heidenhain 型CJD，现报道如下。

　　资料和方法

　　1．临床资料： 男性，70岁,退休工人,长春市人。 因突然视物模糊 1.5个月,双目失明15 d,伴行路不稳和尿便障碍， 于1995年8月14日入院。既往有高血压病及浅表性胃炎。无CJD家族史，无颅脑手术或输血史。查体：神志清楚，言语迟钝，双目失明，眼底正常， 呈痴呆状态。内科检查未见异常，四肢无明显瘫痪，腱反射稍活跃，巴宾斯基征双侧(+)。住院经过中出现肌阵挛及扭转性痉挛。因并发肺内感染，于1995年 10月30日死亡。总病程120 d。

　　2．实验室检查：（1） 脑生物电描记: 先后于发病第45、78、108天(死前12 d)描记；（2） 脑核磁共振检查： 于病后第20天进行1次扫描；（3） 脑组织活检: 钻颅后取右侧额叶皮质,10%中性福尔马林固定,石蜡包埋, HE、KB染色,光镜观察；（4） 免疫组化染色：采用Kitamoto 改良的前处置方法（高压灭菌法）。以PrP多克隆抗体为第一抗体(1∶400)，4℃条件孵育过夜,以后按PAP法进行；（5） 实验鼠传递：将-70℃保存的活检脑组织制
成10%～15%重量/容量匀浆, 接种于10只鼠脑内，所有鼠均来自白求恩医大实验动物中心，经国家检疫合格，观察期限为3年，发病鼠处死后，10%中性福尔马林液固定,石蜡包埋，除HE、 KB染色外，并进行免疫组化染色；（6） PrP基因表达: 静脉取血,分离白细胞，提纯DNA,以特定引物T1、T2扩增, NSPI等酶切位点,1.5%琼脂糖凝胶电泳检测。

　　结果

　　1． 脑生物电描记：住院期间共进行3次脑电描记：（1） 发病后第45天： 基本节律为θ波,伴阵发性同步尖慢波、尖波或三相波发放，间隔0.7～1.0 s；（2 ）发病后第78天：大致同上，但慢波增多；（3 ）发病后第108天：阵发性尖慢波发放消失, 代之全程低波幅不整波。

　　2． 脑组织病理：右侧额叶皮质、软脑膜正常， 大脑灰质深层呈海绵状变性，神经细胞部分脱失，星形胶质细胞增生，无任何炎症反应(图1)。

　　3．免疫组织化学：于大脑额叶灰质深层，相当于海绵状变性处，可见突触型异常PrP沉积(图2)。

　　4．实验鼠传递：共接种10只实验鼠,其中有4只于接种后平均580 d发病,发病鼠的确认除体重减轻、行动不便外,不能证实有视力改变。 组织形态学证实大脑有海绵状变性(图3)，大脑灰质还可发现异常PrP呈片状沉积(图4）。

　　5．PrP基因表达: 该例为密码子129甲硫氨酸纯合子型。

　　讨论

　　Heidenhain型CJD约占散发性CJD的20%,1993年6月至1997年10月德国CJD监测中心统计资料表明:在169例散发性CJD中,有34例(20.1%)为 Heidenhain 型 CJD［1］。发病年龄与散发性类似，平均年龄为65.7岁(51.6～76.4岁)。其病程明显短于散发性CJD，前者平均病程为5.7个月(2.3～14.1个月),后者为7.5个月(1.3 ～32.4个月)。病变部位以双侧枕叶为重，神经细胞脱失和星形胶质细胞增生重于海绵状变性。首发并十分突出的症状为视觉障碍：如视物模糊、视物变形、视觉忽视、视物显小症、色觉障碍， 有的出现视觉疾病缺失感, 甚可发展为双眼全盲。经过中可出现CJD 的其他症状,如进行性痴呆、锥体束或锥体外系损伤症状以及小脑性失调等。79%脑电呈现周期性同步放电,相当一部分脑电改变,以双侧枕叶最为明显。9例脑脊液进行14-3-3蛋白检测,均为阳性。78%神经元特异烯醇化酶 (neuron-specefic enolase)增高至35 ng/ml(13～150 ng/ml)。11例中有6例脑核磁共振检查时底节的T2加权像和质子密度像呈高信号。4例枕叶灰质和视皮质于T2加权像和质子密度像也呈高信号［2］。PrP基因表达证实：Heidenhain型CJD中92

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