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SLE患者血清sICAM |
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张开明 郭志杰 尹兴平 尹国华
我们采用夹心ELISA法对SLE患者血清中可溶性ICAM-1(sICAM-1)水平进行测定，并采用免疫组化法对部分病例皮损ICAM-1表达进行了研究，现将结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 病例选择：SLE患者共48例，取自1994年8月—1997年5月皮肤科门诊及住院患者，部分病例由我院内科及外院提供，女33例，男15例。诊断标准以1982年美国风湿病学会修订的诊断标准为依据，其中活动期27例，稳定期21例，活动期判断标准参照Valentijn法〔1〕，采用临床症状评分，＜10分者为静止期，＞11分者为活动期。正常对照组51名。
1.2 方法：试剂：sICAM-1试剂盒为比利时Medgenix产品，鼠抗人ICAM-1单克隆抗体及过氧化酶标记的链霉卵白素(SP)试剂盒均为Zymed产品，购自北京中山试剂公司。
血清sICAM-1测定：静脉抽血2 ml，分离血清，置于－40 ℃备用待测，采用双抗体夹心ELISA法〔2〕，最后置芬兰Labsystems全自动酶标仪450 nm及650 nm(双波长法)处测各孔吸光度A值，用标准品浓度及A值绘制标准曲线，从中求得sICAM-1含量。
皮损免疫组化：共做9例，取皮损及正常皮肤，正常对照组8例为手术科室切除的正常皮肤组织，采用SP免疫组化法，常规石蜡切片脱蜡至水，3%H2O2室温孵育5分钟，冲洗后PBS浸泡5分钟，10%正常山羊血清封闭10分钟，吸去血清，滴加ICAM-1一抗(每次均设阴性对照)，40 ℃过夜，PBS冲片3次，滴加1%BSA-PBS1∶300稀释的二抗，37 ℃孵育30分钟，PBS冲洗3次，37 ℃DAB显色15～30分钟，自来水冲洗，苏木素复染，中性树胶封片，置显微镜下观察，阳性时在标记处可见棕色颗粒沉积。
常规检查项目：血沉、补体、IgG、IgA、IgM及ANA、抗dsDNA抗体、ENA多肽抗体谱、LBT等。
1.3 统计学处理：将sICAM-1复孔均值及常规检测项目数据输入电脑,采用SPSS软件包进行t检验(双侧检验)及相关分析。
2 结 果
2.1 SLE患者血清sICAM-1测定结果见表1。
表1 SLE患者血清sICAM-1水平测定(±s)
组别 n sICAM-1 与对照组比较
t P值
SLE组 48 357.6±125.4 3.4 ＜0.001
活动期 27 496.4±148.3 4.7 ＜0.001
稳定期 21 218.6±75.3 2.1 ＜0.05
对照组 51 182.1±47.8
注：活动期与稳定期比较t＝4.0，P＜0.001
2.2 血清sICAM-1与ANA、抗dsDNA抗体、ESR、补体及Ig相关分析结果见第48页表2。
表2 血清sICAM-1水平与ANA、抗dsDNA抗体、血沉及补体等相关分析结果
ANA 抗dsDNA抗体 ESR C3 CH50 IgG IgA IgM
r 0.462 0.518 0.476 0.124 0.146 0.263 0.218 0.268
P ＜0.05 ＜0.02 ＜0.05 ＞0.5 ＞0.5 ＞0.2 ＞0.2 ＞0.2
2.3 ICAM-1免疫组化结果，8例正常对照组角朊细胞及血管内皮细胞均未见ICAM-1表达，9例SLE患者正常皮肤有5例真皮血管内皮可见ICAM-1表达，2例基底细胞可见ICAM-1弱表达。皮损染色结果，9例中有4例血管内皮ICAM-1表达为阳性，6例表皮ICAM-1较明显表达，主要在基底细胞及近颗粒层处呈灶性分布。
3 讨 论
3.1 sICAM-1是细胞表面ICAM-1“脱落”进入血清而形成的，正常人血清中sICAM-1水平约100～200μg/L，其主要生物学作用是与细胞膜ICAM-1竞争性结合白细胞表面相应配体，在炎症和免疫反应以及局部炎症细胞浸润中发挥作用〔3〕。
3.2 SLE是一自身免疫引起的持续性慢性炎症反应性疾病，通过对SLE患者皮损ICAM-1免疫组化染色及血清sICAM-1水平测定，进一步显示ICAM-1在SLE发病中具有一定的意义。目[1] [2] 下一页
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