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负载抗原DC CIK细胞对NDV 修饰抗原胃癌细胞杀伤作用

志(TCRα/β、CD3),也有NK细胞的表面标志(CD56)。其细胞毒作用几乎惟一地存在于CD3+ CD56+细胞中。CIK细胞发挥抗肿瘤作用的机制可能是通过黏附因子与肿瘤细胞相互结合后,分泌含有大量BLT脂酶的细胞质颗粒,这些颗粒能够直接穿透封闭的靶细胞膜进行胞吐,从而导致肿瘤细胞的裂解。本研究显示,CIK细胞对SGC7901细胞有较强的杀伤作用,在效靶比为20∶1时杀伤率为46.4%,比化疗药(5FU、DDP)的作用效果好。

  研究发现,DC、CIK细胞和某些抗原肽共同培养能产生多种生物学特性。①增殖活性高,在共培养过程中,DC、CIK两种细胞的数目显著增多,增殖速度甚至呈倍数增长;②细胞毒活性强,共培养的DCCIK细胞具有更高的肿瘤杀伤活性;③杀瘤谱广,共培养的DCCIK细胞对多种肿瘤具有杀伤活性。因此,可增强对某些缺乏特异性抗原的肿瘤细胞的杀伤能力。LINN等[5]研究也证实,共培养DC、CIK能在低效靶比条件下清除大量肿瘤细胞。本研究用反复冻融法来提取胃癌细胞(SGC7901)的肿瘤相关抗原,然后用它致敏DC细胞,用于诱导特异性CIK细胞杀伤胃癌细胞,结果负载SGC7901胃癌细胞抗原的DCCIK细胞对胃癌细胞的杀伤作用明显强于单纯CIK治疗组(P<0.01),显示出识别多克隆抗原的CIK细胞对SGC7901胃癌细胞的杀伤效果较好。

  目前的研究报道,多数只注意了杀伤手段的开发研究,如何能使有效的杀伤细胞有的放矢,成为关键问题。研究结果表明,NDV是副黏病毒科腮腺炎病毒属的成员,其具有修饰肿瘤细胞抗原的作用,在人类癌细胞内的复制比在正常细胞内复制高10 000倍[6],能够选择性杀伤人肿瘤细胞,其与肿瘤细胞的结合是特异和不可逆的,而对人正常细胞无明显影响[7]。VOLKER[8]研究表明, 用类似人体抵抗病毒感染的机制,将肿瘤细胞体外培养,用NDV修饰抗原使其外露,使肿瘤细胞的抗原性增强,然后灭活肿瘤细胞,回输肿瘤病人,即用NDV修饰的自体肿瘤疫苗(NDVATV)进行主动特异性免疫治疗,具有明显的效果,与肿瘤病人的常规治疗的效果比较,能够明显延长病人的生存期。本研究利用NDV能增加肿瘤的免疫原性这一特点,让体外扩增的特异性CIK细胞有的放矢,有针对性地杀伤胃癌细胞。结果显示,NDV本身对SGC7901胃癌细胞具有杀伤性,但同CIK细胞及DCCIK细胞相比较,其杀伤力较弱。用NDV修饰胃癌细胞抗原后,再用特异性DCCIK细胞进行杀伤,取得了前所未有的治疗效果,杀伤率达到83.4%。该研究作为一种新方法,为胃癌的生物治疗奠定了实验基础。

  研究发现,CIK细胞在体外培养15 d左右临床应用的量和效力比率最合适。本研究因实验条件所限,使用培养第9天的DCCIK就达到了如此的疗效,显示出用特异性DCCIK杀伤经NDV修饰抗原的胃癌细胞方法的有效性。CIK细胞是目前较理想的肿瘤杀伤细胞,用于临床肿瘤治疗前景广阔。

  【参考文献】

  [1]于津浦,任秀宝. CIK细胞——肿瘤过激免疫治疗的新希望[J]. 中国肿瘤临床, 2001,28(7):557560.

  [2]李金凤,张震宇. 卵巢癌细胞和脐血树突状细胞融合瘤苗抗肿瘤免疫效应的初步研究[J]. 中国肿瘤临床, 2007,37(14):789793.[3]周晓彬,纪新强,徐莉. PPSM 1.5统计软件的功能及其应用[J]. 青岛大学医学院学报, 2009,45(1):9193.

  [4]NAGARAJ S, ZISKE C, SCHMIDTWOLF I G. Human cytokine  induced killer cells have enhanced in vitro cytolytic activity via nonviral interleukin2 gene transfer[J]. Genet Vaccines Ther, 2004,2(1):12.

  [5]LINN Y C, HUI K M. Cytokine induced killer cells: NK Like T cells with cytotolytic specificity against leukemia[J]. Leuk Lymphoma, 2003,44(9):14571462.

  [6]PECORAAL, RIZVI N, COHEN G I, et al. Phase Ⅰ trial of intravenous administration of PV701, an oncolyt

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