间充质细胞保持增殖活跃状态,形成条状软骨(见图3b);8周时膜管内骨缺损已被新生骨所连接,膜外形成少量骨痂,但生长方向紊乱(见图3c)。荧光镜下:术后2周缺损区内骨小梁表面可见模糊的荧光线(见图4a);4周可见连续的双标记线(见图4b);8周缺损区内可见多条粗大的双标记荧光线,骨小梁增多(见图4c)。
图3 PLGA组的Giemsa染色(HE,×200)(略)
a:术后2周PLGA膜完整,膜管外结缔组织大量增生;b:4周时缺损区内间充质细胞保持增殖活跃状态,形成条状软骨;c:8周时膜管内骨缺损已被新生骨所连接,膜外形成少量骨痂,但生长方向紊乱。
图4 PLGA组的四环素荧光观察(HE,×200)
a:术后2周,缺损区内骨小梁表面可见模糊的荧光线;b:术后4周可见连续的双标记线;c:8周缺损区内可见多条粗大的双标记荧光线,骨小梁增多。
2.3.2 PLGA/bBMP实验组观察(B组) Giemsa染色:术后2周PLGA/bBMP膜完整,膜管外结缔组织大量增生,可见来自骨端的间充质细胞长入,缺损区断端少许骨皮质坏死,缺损区有少量新骨形成(见图5a);4周缺损区内形成较多新骨,成骨细胞和成软骨细胞增殖较活跃(见图5b);8周膜管内骨缺损已被新生骨所连接,膜外形成少量骨痂(见图5c)。荧光镜下:术后2周缺损区内可见稀疏的骨小梁,骨小梁表面可见双标记荧光线(见图6a);4周骨小梁增多,骨小梁表面荧光带增宽,骨的矿化和改建较活跃(见图6b);8周缺损区内骨小梁连接较密,骨小梁表面有宽的双标记荧光线,骨的矿化和改建较活跃(见图6c)。
图5 PLGA/bBMP组Giemsa染色(HE,×200)(略)
a:术后2周PLGA/bBMP膜完整,膜管外结缔组织大量增生,缺损区有少量新骨形成;b:4周缺损区内形成较多新骨,成骨细胞和成软骨细胞增殖较活跃;c:8周膜管内骨缺损已被新生骨所连接,膜外形成少量骨痂。
图6 PLGA/bBMP组四环素免疫荧光(HE,×200)(略)
a:术后2周缺损区内可见稀疏的骨小梁,骨小梁表面可见双标记荧光线;b:4周骨小梁增多,骨小梁表面荧光带增宽;c:8周缺损区内骨小梁连接较密,骨小梁表面有宽的双标记荧光线。
2.3.3 PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ实验组观察(C组) Giemsa染色:术后2周PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ膜完整,膜管外结缔组织大量增生,对膜管形成严密包裹(见图7a);4周缺损区内新骨形成活跃,形成较多软骨,部分骨矿化和改建(见图7b);8周膜管内骨缺损已被新生骨所连接,骨小梁间连接呈网,排列有序,膜外形成少量骨痂(见图7c)。荧光镜下:术后2周缺损区内可见少量的骨小梁,骨小梁表面形成较窄的双标记线(见图8a);4周缺损区骨小梁增多,其表面可见连续的双标记荧光线,骨的矿化和改建较活跃(见图8b);8周缺损区内骨小梁增粗并互相连接,双标记荧光线间距增宽(见图8c)。
图7 PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ组Giemsa染色(HE,×200)(略)
a:术后2周PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ膜完整,膜管外结缔组织大量增生;b:4周缺损区内新骨形成活跃,形成较多软骨;c:8周膜管内骨缺损已被新生骨所连接,骨小梁间连接呈网,排列有序,膜外形成少量骨痂。
图8 PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ组四环素免疫荧光(HE,×200)(略)
a:术后2周缺损区内可见少量的骨小梁,骨小梁表面形成较窄的双标记线;b:4周缺损区骨小梁增多,其表面可见连续的双标记荧光线;c:8周缺损区内骨小梁增粗并互相连接,双标记荧光线间距增宽。
2.3.4 PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ+bFGF实验组观察(D组) Giemsa染色:术后2周PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ+bFGF膜完整,膜管封闭完整,膜管内间充质细胞大量聚集,膜管内有少量新骨形成(见图9a);4周缺损区内间充质细胞仍然保持增殖活跃状态,形成条状软骨(见图9b);8周膜管内骨缺损已被新生骨所连接,骨小梁较致密,骨矿化和改建活跃,膜外 形成少量骨痂(见图9c)。
荧光镜下:术后2周缺损区内骨小梁较多,骨小梁表面形成较窄的双标记线(见图10a);4周缺损区内可见连续的双标记线,骨的矿化和改建较活跃(见图10b);8周缺损区内骨小梁密集,双标记荧光线增宽(见图10c)。
图9 PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ+bFGF实验组Giemsa染色(HE,×200)(略)
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