卵巢癌的基因治疗研究现状及展望

　　【摘要】 随着分子生物学及相关学科的发展, 基因治疗可望成为治疗恶性肿瘤的重要方法。目前基因治疗应用于卵巢癌的临床前实验研究已取得较大进展, 给卵巢癌特别是晚期患者的治疗带来新的希望。卵巢癌基因治疗的方法主要有自杀基因治疗、基因表达封闭、多药耐药基因治疗、联合基因治疗等，现综述近几年来卵巢癌基因治疗的研究进展。

　　【关键词】 卵巢癌;基因治疗;综述

　　卵巢恶性肿瘤是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一, 由于其组织学类型较多, 缺乏有效的早期诊断方法, 且手术和放化疗疗效不佳, 卵巢癌患者的5年生存率仍较低, 成为严重威胁妇科肿瘤患者生命的恶性疾病。在对于卵巢癌治疗方法的探索中, 基因治疗令人瞩目, 在动物实验及一些Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期临床研究中取得了一定疗效, 成为继手术、化疗、放疗之后的一种全新的治疗模式。

　　1 卵巢癌相关基因

　　和其他肿瘤一样,卵巢癌的发生是与细胞增殖分化相关的癌基因、抑癌基因多阶段相互作用的结果。目前已发现K-ras、c-myc、c-erb-B2等癌基因和p53、p16等抑癌基因与卵巢癌密切相关，充分认识卵巢癌特异性基因损害的机制有利于制定合理的基因治疗方案。K-ras 编码蛋白p21 ,通过点突变被激活,使其丧失三磷酸鸟苷酸(GPT)激酶活性,致GTP降解成二磷酸鸟苷酸(GDP)的速度减慢,持续的激活靶分子,使细胞持续增殖,从而导致癌的形成[1]。c-myc编码一种转录因子,与细胞周期由G0期向G1期的转变有关，c-myc的扩增和过度表达,使其丧失了转录控制能力, 以致促使细胞大量增殖[2]。c-erb-B2编码一种细胞表面蛋白,结构与表皮生长因子受体(EGFR)相似,在乳腺癌和卵巢癌的发生中起重要作用[3]。还有一些癌基因如int2、fms、mdd、akt2、c-fos、H-ras、raf-1等,在卵巢癌中偶尔扩增,但并不被认为起重要作用。p53基因是目前研究最深入的抑癌基因,30%～80%的卵巢癌患者存在p53突变。p53其功能好比“分子警察”,监视着细胞基因组的完整性,如果DNA受损,则p53基因通过转录调控机制使细胞分裂停滞于G1期, 以便细胞有足够的时间修复损伤，若修复失败,则启动程序化死亡而引发细胞自尽,即细胞凋亡。此外,p53 蛋白的积累可能加速原发肿瘤的转移和扩散。p53缺陷对化疗的耐受有决定意义[4-5]。多肿瘤抑制基因(MTS1)是人们发现的第一个直接参与细胞周期调控的抑癌基因,其编码蛋白为p16,通过与细胞周期素(cyclinD1)竞争性结合细胞周期素依赖激酶(CDK4),从而使CDK4失活,阻止细胞由G1期进入S期,进而抑制细胞分裂并阻止其向恶性方向发展[6]。

　　2 卵巢癌基因治疗机制

　　肿瘤的发生是多因素、多步骤过程,包括了癌基因的激活和(或)抑癌基因的失活而导致细胞增殖增强与凋亡受到抑制。卵巢癌的发生亦是与细胞增殖分化相关的癌基因、抑癌基因多阶段相互作用的结果，如:erbB、c-myc、K-ras等癌基因的突变与扩增和(或)抑癌基因RB、p53、p16 等的功能丧失均可导致肿瘤发生。通过基因治疗即把正常基因或重组治疗基因经分子生物学技术手段转入异常细胞的DNA系统中,以抑制致病基因表达或修复缺陷基因表达,起到治疗作用[7]。目前,卵巢癌基因治疗方案主要有:自杀基因治疗、基因表达封闭、多药耐药基因治疗和联合基因治疗。

　　3 卵巢癌基因治疗载体

　　实现肿瘤基因治疗的关键是要使用高效、安全的基因导入系统。常用病毒和非病毒系统作为基因导入载体。病毒载体能有效地将原位基因导入肿瘤细胞中,这种带有抗癌基因并特异性杀伤肿瘤细胞的病毒被称之为基因-病毒系统。体内外实验表明,腺病毒介导的卵巢癌转基因治疗能有效抑制卵巢癌细胞生长,并延长卵巢癌小鼠模型生存期[8]。非病毒的质粒内插入具有治疗作用的目的基因及所有顺式调控元件如启动子、增强子及沉默子序列和转录处理信号时,就可用于哺乳细胞的转染,当含有一个病毒复制子时,即可指导质粒在靶细胞核中扩增。质粒与病毒载体相比,虽然基因转染率较低,但不会整合入宿主的基因组而产生致病的野生型病毒。近年来以质粒为载体的基因治疗多使用阳离子脂质体为导入介质,目前阳离子脂质体介导的转基因治疗卵巢癌已进入Ⅰ期临床试验[9]。基因载体系统增强抗癌能力的方法有:①在载体上携带多种治疗基因联合作用,以提高病毒对癌细胞的杀伤力;②修饰载体的外壳蛋白使其特定地与肿瘤细胞结合,并增加其对肿瘤细胞的亲和力;③调控载体的肿瘤特异性启动子或增强子,使治疗基因的表达限于肿瘤细胞,避免对非肿瘤细胞造成伤害。理想的靶向性基因转移载体一

[1] [2] [3] [4] [5] 下一页