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穿山甲及其混淆品鉴别与质量研究 |
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程金友 石俊英 吕鹏月
提要 对穿山甲及其混淆品羊蹄甲、牛蹄甲、猪蹄甲进行了凝胶电泳分析、薄层层析和氨基酸含量分析。结果表明：四种样品的电泳鉴别图谱差异显著，薄层色谱和氨基酸种类基本一致。
关键词 穿山甲； 凝胶电泳； 薄层色谱； 氨基酸
Identification and Quality Studies on Pangolin Scales and its Adulterants
Cheng Jinyou, Shi Junying, Lü Pengyue
Jinan Municipal Institute for Drug Control, Jinan 250001
Abstract The contents of amino acids of Manis pentadactyla Linnaeus and its adulterants (Copra hircus Linnaeus, Bos taurus domesticus Gmelin and sus scrofa domesica Brisson) have been analyzed, and the four samples were also studied by TLC and polyacrylamide gel electrophoresis technique. The results showed that the four samples were similar in TLC, sorts and contents of amino acids, but the protein electrophorogram of the four samples are quite different.
Key words Pangolin scales; Polyacrylamide gel electrophoresis; Thin-layer chromatography; Amino acid
中药穿山甲来源于鲮鲤科动物穿山甲(Manis pentdactyla Linnaeua)的干燥鳞甲，具有通经下乳、消肿排脓、搜风通络之功。由于其野生资源濒临灭绝，驯化养殖不易，使穿山甲药材供需矛盾突出，临床应用受到限制，有的地区以羊、牛、猪蹄甲代替。为了探讨穿山甲及其混淆品的鉴别与质量关系，我们以四种样品进行了凝胶电泳分析、薄层层析和氨基酸含量分析。
1 材料与仪器
1.1 实验材料：穿山甲(Manis pentdactyla Linnaeua)由广西药材公司提供；羊蹄甲(Capra hircus Linnaeus)、牛蹄甲(Bos taurus domesticus Gmelin)、猪蹄甲(Sus scrofa domesica Brisson)采自济南长清县。
1.2 实验仪器：日立835-50型自动氨基酸分析仪；WMK-80型温度控制器；SCR-9型稳压稳流电泳仪；DYY-3型电泳池；800型离心沉淀器等。
2 方法与结果
2.1 凝胶电泳分析：取样品0.5 g，加入稀释4倍的浓缩胶缓冲液，研磨成匀浆状，离心15～20 min(2500r/min)，取上清液供点样用。凝胶的制备、电泳操作、泳动率计算等按文献方法［1，2］进行，结果参见表1。
表1 穿山甲及其混淆品的主要鉴别谱带泳动率
谱带名称 穿山甲 羊蹄甲 牛蹄甲 猪蹄甲
A1 0 0 0.20 0
A2 0.32 0.31 0 0.29
B1 0 0.41 0 0
B2 0.46 0.47 0.48 0.46
B3 0.65 0 0 0
B4 0.68 0 0 0
2.2 薄层层析：取样品粗粉各1 g，置索氏提取器中，分别用氯仿和75%乙醇提取4 h，提取液回收溶剂至9 ml，放冷过滤，滤液蒸干，残渣加1 ml氯仿或75%乙醇溶解，制成1 g/ml的溶液供点样用。吸取上述溶液10 ml，分别点于硅胶G薄层板上，以两种不同的溶剂系统展开，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视有无荧光斑点。氯仿提取物喷醋酐－浓硫酸(9∶1)溶液使显色，乙醇提取物喷3%茚三酮乙醇液加热使显色，记录斑点位置及颜色。
2.3 氨基酸分析：准确称取样品置水解管中，[1] [2] 下一页
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