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胚胎小鼠下丘脑培养状态SRIF神经元的发生免疫细胞化学研究 |
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杨浩 梁喆 鞠躬
【摘要】 目的 研究胚胎小鼠下丘脑培养状态下SRIF神经元的发生。 方法 采用原代分离培养的方法，将胚胎小鼠下丘脑进行体外分散细胞培养，观察了下丘脑细胞的生长分化过程，并且对培养不同时间的细胞作生长抑素(SRIF)免疫细胞化学染色，阳性神经元记数，各种形态神经元所占的百分比统计。 结果 胚胎小鼠下丘脑SRIF阳性神经元在体外生长发育不同时间细胞指数不同：7d时为24±1.52，10d时为34±2.20，12d时为34±3.30，14d时为104±6.32，16d时为68±5.34，20d时为29±1.54，其中在培养14d时，SRIF阳性神经元达到高峰，以后出现下降趋势。而且神经元的形态、单极、双极、多极神经元的数目以及突起呈色深浅在发育过程中也有较大的变化，各种占比例较大神经元出现的时期也不一样，其中，单极在培养10、14、16d时分别占52.3%、60.0%、43.3%。双极在培养10、14、16d时分别占30.7%、20.7%、30.1%。多极神经元在培养7、12、20d时分别占81.5%、90.1%、67.3%。 结论 (1)在培养状态下，下丘脑不同核区的细胞发育速度不同，并且随时间点的变化呈现规律性变化；(2)不同类型的SRIF神经元的发育随着不同的时间点呈现出不同比例很可能反映一些SRIF神经元的功能发生了转化；(3)体外培养状态下SRIF神经元的发育可能反映在体SRIF神经元的情况。
【关键词】 生长抑素；下丘脑；细胞培养；免疫细胞化学
【中图分类号】 R322.81；R321.5 【文献标识码】 A 【文章编号】 0529-1356(2000)03-202
THE ONTOGENCY OF THE SRIF NEURONS IN THE HYPOTHALAMUS
OF EMBRYONIC MICE in vitroA STUDY OF
IMMUNOCYTOCHEMICAL STAINING
YANG Hao, LIANG Zhe, JU Gong
(Institute of Neurosciences,the Fourth Military Medical University,Xi an 710032,China)
【Abstract】 Objective The purpose of the present study is to illustrate ontogency of the SRIF neurons in the hypothalamus of embryonic mice in vitro. Methods Neurons were dissociated from the hypothalamus of embryonic mice and cultured primarily.The process of the growth and differentiation of hypothalamic neurons was observed in vitro.The cultured hypothalamic neurons were stained immunocytochemically with anti-SRIF antibody at different culture times.The number of the SRIF-positive cells,which were different in morphology,was counted and the percentages of different SRIF-positive neurons were calculated. Results The numbers of the SRIF-positive cells were distinct in different growth and differentiation periods.Thus,the number of the neurons was 24±1.52,34±3.30,104±6.32,68±5.34 or 29±1.54 at 7,10,14,16 or 20 days in vitro (DIV),respectively.The number of the neur[1] [2] [3] 下一页
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